中文字幕在线看_国产A√_国产精品无码一区二区在线观不卡_成人黄色av_99精品无码一区二区在线视频_一区二区三区黄色一级_亚洲欧美日韩在线综合_一区二区三区不卡在线观看_日日骚亚洲欧美日韩综合一区_亚洲A√在线视频_欧美亚洲中文字幕_久久精品国产亚洲AV麻豆不卡_一区二区三区精品国产_日韩欧美亚洲中出在线_国产二区三区毛片大全

服務咨詢熱線:

021-66030766

TECHNICAL ARTICLES

技術文章

當前位置:首頁技術文章生物發光技術研究及其應用進展

生物發光技術研究及其應用進展

更新時間:2015-05-08點擊次數:1490

摘要:
目的:了解生物發光種類、機理及其在醫學、生物科學、食品、環保等領域的應用。
方法:對有關的文獻中生物發光種類、機理及其在上述領域的具體應用進行綜述。
結果:生物發光有兩類,機理明確,應用廣泛。
結論:生物發光在很多領域的應用日趨廣泛,對其深入了解和研究至關重要。


生物發光是生物發光器在細胞或生物體內發生光能釋放反應的過程。本文簡要介紹生物發光種類、機理及其在醫學、生命科學、食品和環保等領域的應用。


1 種類

生物發光主要有2種:①發生化學或生物學反應后產生的光能信號,主要有含熒光素酶的細菌、真菌、昆蟲等;②被激發后產生的光能信號,主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚、水螅等。


2 機理

2.1熒光素酶
熒光素酶是生物體內催化熒光素或脂肪醛氧化發光的一類酶的總稱。依來源,可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,FL)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,BL)。FL在Mg、ATP、O2的參與下,催化D-熒光素氧化脫羧,產生激活態氧化熒光素,并放出光子,產生550~580nm的熒光。BL以脂肪醛為底物,在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,產生490nm的熒光。


2.2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質內部第65-67位絲氨酸、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環化和氧化形成的,用紫外或藍光激發即能發出肉眼可見的綠色熒光,無需任何底物或輔助因子。


3 應用

生物發光作為一種非放射性、非創傷損害性、高靈敏度、實時動態的檢測技術,在醫學生物學研究、食品及環境檢測等領域應用廣泛。


3.1在生物醫學研究中的應用
生物發光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續動態觀察,在生物醫學領域被廣泛用于致病機理、藥物機制、新藥篩選評價等研究。


熒光素酶被廣泛應用于研究病毒感染、復制、治療。Luker用熒光素酶基因標記牛痘病毒,免疫1h后即可測得細胞內熒光,熒光的變化量直接反映病毒的復制量。王建東利用熒光素酶基因標記肺癌細胞,并將其接種于嚴重聯合免疫缺陷小鼠皮下,成功建立了穩定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,為肺癌進展、轉移以及藥物敏感性等相關研究奠定了基礎。


朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標記毒性大腸桿菌(ETEC),獲得了GFP基因表達、遺傳穩定的發光標記菌株,為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎。通過ETEc標記的GFP熒光可準確、簡單、快速反應細菌易位率的變化,為益生素篩選、評價提供依據。


3.2在生物科學研究中的應用

3.2.1在分子生物學中的應用熒光素酶基因廣泛應用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉錄調控研究,尤其對低水平表達的調控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,探討HBV轉導后調節序列(HPRE)的功能元件(α,β1,β2)對INF-α作用的影響,HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,而α,β1在INF-α應答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節奏,Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節律性。


Ikawa制作了在肌肉、脾、腎、心臟等器官中表達GFP的轉基因小鼠,表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標記,對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉基因小鼠,大大提高轉基因動物的制作率,減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。


3.2.2在細胞生物學中的應用
R Paulmurugan應用蟲熒光素酶對成肌調節因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網絡、哺乳動物細胞中蛋白質磷酸化提供了一個可靠、快速的方法。


GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態變化、細胞器動力學和內膜系統的運輸、信息轉導、病毒的運動和大分子的運輸等,Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,用激光掃描共聚焦顯微鏡,觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。


3.3監測環境
發光細菌發光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關系,能穩定、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環境樣本中MC結果和HPLC法檢測結果相關性較好,作為一種快速檢測方法,尤其對大批量、低濃度MC水樣的監測有較好的應用前景。于海將發光細菌固定于光纖表面,與光檢測系統結合,開發了一種發光細菌光纖傳感器,用于水中污染物毒性快速監測和評價具有較好的準確性和靈敏度。



3.4檢驗食品

3.4.1色素  
黨亞愛證明17種常用色素對發光細菌均有一定的急性毒性,細菌發光強度與色素毒性呈負相關,發光細菌可簡便、快速檢測色素口。

3.4.2 致癌物 
江敏研究了吲哚、吡啶、喹啉等6種含氮雜環化合物對發光細菌的急性毒性作用。結果表明,發光細菌的相對發光度均隨化合物濃度增加而線性降低,具良好相關性。

3.4.2微生物
高岳利用ATP生物發光技術對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結果與標準細菌培養方法有良好相關性,且不需復雜的設備,可用于食品快速篩選和現場檢測,是一項值得推廣的新技術。

3.4.3檢測農藥殘留
袁東星發現發光細菌發光強度與有機磷農藥濃度呈負相關,可用于現場快速檢測,稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。


4小結與展望

生物發光技術已在生物醫學、農產品、環保等領域中發揮重要作用。相信,隨著研究的進一步深入,它將在理論研究和實際應用中產生更大的價值。

摘要:
目的:了解生物發光種類、機理及其在醫學、生物科學、食品、環保等領域的應用。
方法:對有關的文獻中生物發光種類、機理及其在上述領域的具體應用進行綜述。
結果:生物發光有兩類,機理明確,應用廣泛。
結論:生物發光在很多領域的應用日趨廣泛,對其深入了解和研究至關重要。


生物發光是生物發光器在細胞或生物體內發生光能釋放反應的過程。本文簡要介紹生物發光種類、機理及其在醫學、生命科學、食品和環保等領域的應用。


1 種類

生物發光主要有2種:①發生化學或生物學反應后產生的光能信號,主要有含熒光素酶的細菌、真菌、昆蟲等;②被激發后產生的光能信號,主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚、水螅等。


2 機理

2.1熒光素酶
熒光素酶是生物體內催化熒光素或脂肪醛氧化發光的一類酶的總稱。依來源,可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,FL)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,BL)。FL在Mg、ATP、O2的參與下,催化D-熒光素氧化脫羧,產生激活態氧化熒光素,并放出光子,產生550~580nm的熒光。BL以脂肪醛為底物,在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,產生490nm的熒光。


2.2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質內部第65-67位絲氨酸、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環化和氧化形成的,用紫外或藍光激發即能發出肉眼可見的綠色熒光,無需任何底物或輔助因子。


3 應用

生物發光作為一種非放射性、非創傷損害性、高靈敏度、實時動態的檢測技術,在醫學生物學研究、食品及環境檢測等領域應用廣泛。


3.1在生物醫學研究中的應用
生物發光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續動態觀察,在生物醫學領域被廣泛用于致病機理、藥物機制、新藥篩選評價等研究。


熒光素酶被廣泛應用于研究病毒感染、復制、治療。Luker用熒光素酶基因標記牛痘病毒,免疫1h后即可測得細胞內熒光,熒光的變化量直接反映病毒的復制量。王建東利用熒光素酶基因標記肺癌細胞,并將其接種于嚴重聯合免疫缺陷小鼠皮下,成功建立了穩定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,為肺癌進展、轉移以及藥物敏感性等相關研究奠定了基礎。


朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標記毒性大腸桿菌(ETEC),獲得了GFP基因表達、遺傳穩定的發光標記菌株,為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎。通過ETEc標記的GFP熒光可準確、簡單、快速反應細菌易位率的變化,為益生素篩選、評價提供依據。


3.2在生物科學研究中的應用

3.2.1在分子生物學中的應用熒光素酶基因廣泛應用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉錄調控研究,尤其對低水平表達的調控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,探討HBV轉導后調節序列(HPRE)的功能元件(α,β1,β2)對INF-α作用的影響,HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,而α,β1在INF-α應答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節奏,Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節律性。


Ikawa制作了在肌肉、脾、腎、心臟等器官中表達GFP的轉基因小鼠,表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標記,對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉基因小鼠,大大提高轉基因動物的制作率,減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。


3.2.2在細胞生物學中的應用
R Paulmurugan應用蟲熒光素酶對成肌調節因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網絡、哺乳動物細胞中蛋白質磷酸化提供了一個可靠、快速的方法。


GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態變化、細胞器動力學和內膜系統的運輸、信息轉導、病毒的運動和大分子的運輸等,Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,用激光掃描共聚焦顯微鏡,觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。


3.3監測環境
發光細菌發光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關系,能穩定、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環境樣本中MC結果和HPLC法檢測結果相關性較好,作為一種快速檢測方法,尤其對大批量、低濃度MC水樣的監測有較好的應用前景。于海將發光細菌固定于光纖表面,與光檢測系統結合,開發了一種發光細菌光纖傳感器,用于水中污染物毒性快速監測和評價具有較好的準確性和靈敏度。



3.4檢驗食品

3.4.1色素  
黨亞愛證明17種常用色素對發光細菌均有一定的急性毒性,細菌發光強度與色素毒性呈負相關,發光細菌可簡便、快速檢測色素口。

3.4.2 致癌物 
江敏研究了吲哚、吡啶、喹啉等6種含氮雜環化合物對發光細菌的急性毒性作用。結果表明,發光細菌的相對發光度均隨化合物濃度增加而線性降低,具良好相關性。

3.4.2微生物
高岳利用ATP生物發光技術對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結果與標準細菌培養方法有良好相關性,且不需復雜的設備,可用于食品快速篩選和現場檢測,是一項值得推廣的新技術。

3.4.3檢測農藥殘留
袁東星發現發光細菌發光強度與有機磷農藥濃度呈負相關,可用于現場快速檢測,稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。


4小結與展望

生物發光技術已在生物醫學、農產品、環保等領域中發揮重要作用。相信,隨著研究的進一步深入,它將在理論研究和實際應用中產生更大的價值。

摘要:
目的:了解生物發光種類、機理及其在醫學、生物科學、食品、環保等領域的應用。
方法:對有關的文獻中生物發光種類、機理及其在上述領域的具體應用進行綜述。
結果:生物發光有兩類,機理明確,應用廣泛。
結論:生物發光在很多領域的應用日趨廣泛,對其深入了解和研究至關重要。


生物發光是生物發光器在細胞或生物體內發生光能釋放反應的過程。本文簡要介紹生物發光種類、機理及其在醫學、生命科學、食品和環保等領域的應用。


1 種類

生物發光主要有2種:①發生化學或生物學反應后產生的光能信號,主要有含熒光素酶的細菌、真菌、昆蟲等;②被激發后產生的光能信號,主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚、水螅等。


2 機理

2.1熒光素酶
熒光素酶是生物體內催化熒光素或脂肪醛氧化發光的一類酶的總稱。依來源,可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,FL)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,BL)。FL在Mg、ATP、O2的參與下,催化D-熒光素氧化脫羧,產生激活態氧化熒光素,并放出光子,產生550~580nm的熒光。BL以脂肪醛為底物,在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,產生490nm的熒光。


2.2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質內部第65-67位絲氨酸、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環化和氧化形成的,用紫外或藍光激發即能發出肉眼可見的綠色熒光,無需任何底物或輔助因子。


3 應用

生物發光作為一種非放射性、非創傷損害性、高靈敏度、實時動態的檢測技術,在醫學生物學研究、食品及環境檢測等領域應用廣泛。


3.1在生物醫學研究中的應用
生物發光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續動態觀察,在生物醫學領域被廣泛用于致病機理、藥物機制、新藥篩選評價等研究。


熒光素酶被廣泛應用于研究病毒感染、復制、治療。Luker用熒光素酶基因標記牛痘病毒,免疫1h后即可測得細胞內熒光,熒光的變化量直接反映病毒的復制量。王建東利用熒光素酶基因標記肺癌細胞,并將其接種于嚴重聯合免疫缺陷小鼠皮下,成功建立了穩定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,為肺癌進展、轉移以及藥物敏感性等相關研究奠定了基礎。


朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標記毒性大腸桿菌(ETEC),獲得了GFP基因表達、遺傳穩定的發光標記菌株,為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎。通過ETEc標記的GFP熒光可準確、簡單、快速反應細菌易位率的變化,為益生素篩選、評價提供依據。


3.2在生物科學研究中的應用

3.2.1在分子生物學中的應用熒光素酶基因廣泛應用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉錄調控研究,尤其對低水平表達的調控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,探討HBV轉導后調節序列(HPRE)的功能元件(α,β1,β2)對INF-α作用的影響,HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,而α,β1在INF-α應答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節奏,Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節律性。


Ikawa制作了在肌肉、脾、腎、心臟等器官中表達GFP的轉基因小鼠,表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標記,對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉基因小鼠,大大提高轉基因動物的制作率,減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。


3.2.2在細胞生物學中的應用
R Paulmurugan應用蟲熒光素酶對成肌調節因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網絡、哺乳動物細胞中蛋白質磷酸化提供了一個可靠、快速的方法。


GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態變化、細胞器動力學和內膜系統的運輸、信息轉導、病毒的運動和大分子的運輸等,Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,用激光掃描共聚焦顯微鏡,觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。


3.3監測環境
發光細菌發光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關系,能穩定、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環境樣本中MC結果和HPLC法檢測結果相關性較好,作為一種快速檢測方法,尤其對大批量、低濃度MC水樣的監測有較好的應用前景。于海將發光細菌固定于光纖表面,與光檢測系統結合,開發了一種發光細菌光纖傳感器,用于水中污染物毒性快速監測和評價具有較好的準確性和靈敏度。



3.4檢驗食品

3.4.1色素  
黨亞愛證明17種常用色素對發光細菌均有一定的急性毒性,細菌發光強度與色素毒性呈負相關,發光細菌可簡便、快速檢測色素口。

3.4.2 致癌物 
江敏研究了吲哚、吡啶、喹啉等6種含氮雜環化合物對發光細菌的急性毒性作用。結果表明,發光細菌的相對發光度均隨化合物濃度增加而線性降低,具良好相關性。

3.4.2微生物
高岳利用ATP生物發光技術對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結果與標準細菌培養方法有良好相關性,且不需復雜的設備,可用于食品快速篩選和現場檢測,是一項值得推廣的新技術。

3.4.3檢測農藥殘留
袁東星發現發光細菌發光強度與有機磷農藥濃度呈負相關,可用于現場快速檢測,稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。


4小結與展望

生物發光技術已在生物醫學、農產品、環保等領域中發揮重要作用。相信,隨著研究的進一步深入,它將在理論研究和實際應用中產生更大的價值。摘要:

目的:了解生物發光種類、機理及其在醫學、生物科學、食品、環保等領域的應用。
方法:對有關的文獻中生物發光種類、機理及其在上述領域的具體應用進行綜述。
結果:生物發光有兩類,機理明確,應用廣泛。
結論:生物發光在很多領域的應用日趨廣泛,對其深入了解和研究至關重要。


生物發光是生物發光器在細胞或生物體內發生光能釋放反應的過程。本文簡要介紹生物發光種類、機理及其在醫學、生命科學、食品和環保等領域的應用。


1 種類

生物發光主要有2種:①發生化學或生物學反應后產生的光能信號,主要有含熒光素酶的細菌、真菌、昆蟲等;②被激發后產生的光能信號,主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚、水螅等。


2 機理

2.1熒光素酶
熒光素酶是生物體內催化熒光素或脂肪醛氧化發光的一類酶的總稱。依來源,可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,FL)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,BL)。FL在Mg、ATP、O2的參與下,催化D-熒光素氧化脫羧,產生激活態氧化熒光素,并放出光子,產生550~580nm的熒光。BL以脂肪醛為底物,在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,產生490nm的熒光。


2.2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質內部第65-67位絲氨酸、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環化和氧化形成的,用紫外或藍光激發即能發出肉眼可見的綠色熒光,無需任何底物或輔助因子。


3 應用

生物發光作為一種非放射性、非創傷損害性、高靈敏度、實時動態的檢測技術,在醫學生物學研究、食品及環境檢測等領域應用廣泛。


3.1在生物醫學研究中的應用
生物發光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續動態觀察,在生物醫學領域被廣泛用于致病機理、藥物機制、新藥篩選評價等研究。


熒光素酶被廣泛應用于研究病毒感染、復制、治療。Luker用熒光素酶基因標記牛痘病毒,免疫1h后即可測得細胞內熒光,熒光的變化量直接反映病毒的復制量。王建東利用熒光素酶基因標記肺癌細胞,并將其接種于嚴重聯合免疫缺陷小鼠皮下,成功建立了穩定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,為肺癌進展、轉移以及藥物敏感性等相關研究奠定了基礎。


朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標記毒性大腸桿菌(ETEC),獲得了GFP基因表達、遺傳穩定的發光標記菌株,為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎。通過ETEc標記的GFP熒光可準確、簡單、快速反應細菌易位率的變化,為益生素篩選、評價提供依據。


3.2在生物科學研究中的應用

3.2.1在分子生物學中的應用熒光素酶基因廣泛應用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉錄調控研究,尤其對低水平表達的調控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,探討HBV轉導后調節序列(HPRE)的功能元件(α,β1,β2)對INF-α作用的影響,HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,而α,β1在INF-α應答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節奏,Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節律性。


Ikawa制作了在肌肉、脾、腎、心臟等器官中表達GFP的轉基因小鼠,表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標記,對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉基因小鼠,大大提高轉基因動物的制作率,減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。


3.2.2在細胞生物學中的應用
R Paulmurugan應用蟲熒光素酶對成肌調節因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網絡、哺乳動物細胞中蛋白質磷酸化提供了一個可靠、快速的方法。


GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態變化、細胞器動力學和內膜系統的運輸、信息轉導、病毒的運動和大分子的運輸等,Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,用激光掃描共聚焦顯微鏡,觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。


3.3監測環境
發光細菌發光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關系,能穩定、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環境樣本中MC結果和HPLC法檢測結果相關性較好,作為一種快速檢測方法,尤其對大批量、低濃度MC水樣的監測有較好的應用前景。于海將發光細菌固定于光纖表面,與光檢測系統結合,開發了一種發光細菌光纖傳感器,用于水中污染物毒性快速監測和評價具有較好的準確性和靈敏度。



3.4檢驗食品

3.4.1色素  
黨亞愛證明17種常用色素對發光細菌均有一定的急性毒性,細菌發光強度與色素毒性呈負相關,發光細菌可簡便、快速檢測色素口。

3.4.2 致癌物 
江敏研究了吲哚、吡啶、喹啉等6種含氮雜環化合物對發光細菌的急性毒性作用。結果表明,發光細菌的相對發光度均隨化合物濃度增加而線性降低,具良好相關性。

3.4.2微生物
高岳利用ATP生物發光技術對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結果與標準細菌培養方法有良好相關性,且不需復雜的設備,可用于食品快速篩選和現場檢測,是一項值得推廣的新技術。

3.4.3檢測農藥殘留
袁東星發現發光細菌發光強度與有機磷農藥濃度呈負相關,可用于現場快速檢測,稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。


4小結與展望

生物發光技術已在生物醫學、農產品、環保等領域中發揮重要作用。相信,隨著研究的進一步深入,它將在理論研究和實際應用中產生更大的價值。摘要:

目的:了解生物發光種類、機理及其在醫學、生物科學、食品、環保等領域的應用。
方法:對有關的文獻中生物發光種類、機理及其在上述領域的具體應用進行綜述。
結果:生物發光有兩類,機理明確,應用廣泛。
結論:生物發光在很多領域的應用日趨廣泛,對其深入了解和研究至關重要。


生物發光是生物發光器在細胞或生物體內發生光能釋放反應的過程。本文簡要介紹生物發光種類、機理及其在醫學、生命科學、食品和環保等領域的應用。


1 種類

生物發光主要有2種:①發生化學或生物學反應后產生的光能信號,主要有含熒光素酶的細菌、真菌、昆蟲等;②被激發后產生的光能信號,主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚、水螅等。


2 機理

2.1熒光素酶
熒光素酶是生物體內催化熒光素或脂肪醛氧化發光的一類酶的總稱。依來源,可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,FL)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,BL)。FL在Mg、ATP、O2的參與下,催化D-熒光素氧化脫羧,產生激活態氧化熒光素,并放出光子,產生550~580nm的熒光。BL以脂肪醛為底物,在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,產生490nm的熒光。


2.2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質內部第65-67位絲氨酸、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環化和氧化形成的,用紫外或藍光激發即能發出肉眼可見的綠色熒光,無需任何底物或輔助因子。


3 應用

生物發光作為一種非放射性、非創傷損害性、高靈敏度、實時動態的檢測技術,在醫學生物學研究、食品及環境檢測等領域應用廣泛。


3.1在生物醫學研究中的應用
生物發光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續動態觀察,在生物醫學領域被廣泛用于致病機理、藥物機制、新藥篩選評價等研究。


熒光素酶被廣泛應用于研究病毒感染、復制、治療。Luker用熒光素酶基因標記牛痘病毒,免疫1h后即可測得細胞內熒光,熒光的變化量直接反映病毒的復制量。王建東利用熒光素酶基因標記肺癌細胞,并將其接種于嚴重聯合免疫缺陷小鼠皮下,成功建立了穩定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,為肺癌進展、轉移以及藥物敏感性等相關研究奠定了基礎。


朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標記毒性大腸桿菌(ETEC),獲得了GFP基因表達、遺傳穩定的發光標記菌株,為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎。通過ETEc標記的GFP熒光可準確、簡單、快速反應細菌易位率的變化,為益生素篩選、評價提供依據。


3.2在生物科學研究中的應用

3.2.1在分子生物學中的應用熒光素酶基因廣泛應用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉錄調控研究,尤其對低水平表達的調控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,探討HBV轉導后調節序列(HPRE)的功能元件(α,β1,β2)對INF-α作用的影響,HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,而α,β1在INF-α應答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節奏,Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節律性。


Ikawa制作了在肌肉、脾、腎、心臟等器官中表達GFP的轉基因小鼠,表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標記,對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉基因小鼠,大大提高轉基因動物的制作率,減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。


3.2.2在細胞生物學中的應用
R Paulmurugan應用蟲熒光素酶對成肌調節因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網絡、哺乳動物細胞中蛋白質磷酸化提供了一個可靠、快速的方法。


GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態變化、細胞器動力學和內膜系統的運輸、信息轉導、病毒的運動和大分子的運輸等,Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,用激光掃描共聚焦顯微鏡,觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。


3.3監測環境
發光細菌發光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關系,能穩定、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環境樣本中MC結果和HPLC法檢測結果相關性較好,作為一種快速檢測方法,尤其對大批量、低濃度MC水樣的監測有較好的應用前景。于海將發光細菌固定于光纖表面,與光檢測系統結合,開發了一種發光細菌光纖傳感器,用于水中污染物毒性快速監測和評價具有較好的準確性和靈敏度。



3.4檢驗食品

3.4.1色素  
黨亞愛證明17種常用色素對發光細菌均有一定的急性毒性,細菌發光強度與色素毒性呈負相關,發光細菌可簡便、快速檢測色素口。

3.4.2 致癌物 
江敏研究了吲哚、吡啶、喹啉等6種含氮雜環化合物對發光細菌的急性毒性作用。結果表明,發光細菌的相對發光度均隨化合物濃度增加而線性降低,具良好相關性。

3.4.2微生物
高岳利用ATP生物發光技術對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結果與標準細菌培養方法有良好相關性,且不需復雜的設備,可用于食品快速篩選和現場檢測,是一項值得推廣的新技術。

3.4.3檢測農藥殘留
袁東星發現發光細菌發光強度與有機磷農藥濃度呈負相關,可用于現場快速檢測,稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。


4小結與展望

生物發光技術已在生物醫學、農產品、環保等領域中發揮重要作用。相信,隨著研究的進一步深入,它將在理論研究和實際應用中產生更大的價值。

摘要:
目的:了解生物發光種類、機理及其在醫學、生物科學、食品、環保等領域的應用。
方法:對有關的文獻中生物發光種類、機理及其在上述領域的具體應用進行綜述。
結果:生物發光有兩類,機理明確,應用廣泛。
結論:生物發光在很多領域的應用日趨廣泛,對其深入了解和研究至關重要。


生物發光是生物發光器在細胞或生物體內發生光能釋放反應的過程。本文簡要介紹生物發光種類、機理及其在醫學、生命科學、食品和環保等領域的應用。


1 種類

生物發光主要有2種:①發生化學或生物學反應后產生的光能信號,主要有含熒光素酶的細菌、真菌、昆蟲等;②被激發后產生的光能信號,主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚、水螅等。


2 機理

2.1熒光素酶
熒光素酶是生物體內催化熒光素或脂肪醛氧化發光的一類酶的總稱。依來源,可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,FL)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,BL)。FL在Mg、ATP、O2的參與下,催化D-熒光素氧化脫羧,產生激活態氧化熒光素,并放出光子,產生550~580nm的熒光。BL以脂肪醛為底物,在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,產生490nm的熒光。


2.2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質內部第65-67位絲氨酸、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環化和氧化形成的,用紫外或藍光激發即能發出肉眼可見的綠色熒光,無需任何底物或輔助因子。


3 應用

生物發光作為一種非放射性、非創傷損害性、高靈敏度、實時動態的檢測技術,在醫學生物學研究、食品及環境檢測等領域應用廣泛。


3.1在生物醫學研究中的應用
生物發光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續動態觀察,在生物醫學領域被廣泛用于致病機理、藥物機制、新藥篩選評價等研究。


熒光素酶被廣泛應用于研究病毒感染、復制、治療。Luker用熒光素酶基因標記牛痘病毒,免疫1h后即可測得細胞內熒光,熒光的變化量直接反映病毒的復制量。王建東利用熒光素酶基因標記肺癌細胞,并將其接種于嚴重聯合免疫缺陷小鼠皮下,成功建立了穩定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,為肺癌進展、轉移以及藥物敏感性等相關研究奠定了基礎。


朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標記毒性大腸桿菌(ETEC),獲得了GFP基因表達、遺傳穩定的發光標記菌株,為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎。通過ETEc標記的GFP熒光可準確、簡單、快速反應細菌易位率的變化,為益生素篩選、評價提供依據。


3.2在生物科學研究中的應用

3.2.1在分子生物學中的應用熒光素酶基因廣泛應用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉錄調控研究,尤其對低水平表達的調控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,探討HBV轉導后調節序列(HPRE)的功能元件(α,β1,β2)對INF-α作用的影響,HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,而α,β1在INF-α應答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節奏,Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節律性。


Ikawa制作了在肌肉、脾、腎、心臟等器官中表達GFP的轉基因小鼠,表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標記,對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉基因小鼠,大大提高轉基因動物的制作率,減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。


3.2.2在細胞生物學中的應用
R Paulmurugan應用蟲熒光素酶對成肌調節因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網絡、哺乳動物細胞中蛋白質磷酸化提供了一個可靠、快速的方法。


GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態變化、細胞器動力學和內膜系統的運輸、信息轉導、病毒的運動和大分子的運輸等,Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,用激光掃描共聚焦顯微鏡,觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。


3.3監測環境
發光細菌發光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關系,能穩定、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環境樣本中MC結果和HPLC法檢測結果相關性較好,作為一種快速檢測方法,尤其對大批量、低濃度MC水樣的監測有較好的應用前景。于海將發光細菌固定于光纖表面,與光檢測系統結合,開發了一種發光細菌光纖傳感器,用于水中污染物毒性快速監測和評價具有較好的準確性和靈敏度。



3.4檢驗食品

3.4.1色素  
黨亞愛證明17種常用色素對發光細菌均有一定的急性毒性,細菌發光強度與色素毒性呈負相關,發光細菌可簡便、快速檢測色素口。

3.4.2 致癌物 
江敏研究了吲哚、吡啶、喹啉等6種含氮雜環化合物對發光細菌的急性毒性作用。結果表明,發光細菌的相對發光度均隨化合物濃度增加而線性降低,具良好相關性。

3.4.2微生物
高岳利用ATP生物發光技術對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結果與標準細菌培養方法有良好相關性,且不需復雜的設備,可用于食品快速篩選和現場檢測,是一項值得推廣的新技術。

3.4.3檢測農藥殘留
袁東星發現發光細菌發光強度與有機磷農藥濃度呈負相關,可用于現場快速檢測,稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。


4小結與展望

生物發光技術已在生物醫學、農產品、環保等領域中發揮重要作用。相信,隨著研究的進一步深入,它將在理論研究和實際應用中產生更大的價值。摘要:

目的:了解生物發光種類、機理及其在醫學、生物科學、食品、環保等領域的應用。
方法:對有關的文獻中生物發光種類、機理及其在上述領域的具體應用進行綜述。
結果:生物發光有兩類,機理明確,應用廣泛。
結論:生物發光在很多領域的應用日趨廣泛,對其深入了解和研究至關重要。


生物發光是生物發光器在細胞或生物體內發生光能釋放反應的過程。本文簡要介紹生物發光種類、機理及其在醫學、生命科學、食品和環保等領域的應用。


1 種類

生物發光主要有2種:①發生化學或生物學反應后產生的光能信號,主要有含熒光素酶的細菌、真菌、昆蟲等;②被激發后產生的光能信號,主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚、水螅等。


2 機理

2.1熒光素酶
熒光素酶是生物體內催化熒光素或脂肪醛氧化發光的一類酶的總稱。依來源,可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,FL)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,BL)。FL在Mg、ATP、O2的參與下,催化D-熒光素氧化脫羧,產生激活態氧化熒光素,并放出光子,產生550~580nm的熒光。BL以脂肪醛為底物,在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,產生490nm的熒光。


2.2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質內部第65-67位絲氨酸、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環化和氧化形成的,用紫外或藍光激發即能發出肉眼可見的綠色熒光,無需任何底物或輔助因子。


3 應用

生物發光作為一種非放射性、非創傷損害性、高靈敏度、實時動態的檢測技術,在醫學生物學研究、食品及環境檢測等領域應用廣泛。


3.1在生物醫學研究中的應用
生物發光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續動態觀察,在生物醫學領域被廣泛用于致病機理、藥物機制、新藥篩選評價等研究。


熒光素酶被廣泛應用于研究病毒感染、復制、治療。Luker用熒光素酶基因標記牛痘病毒,免疫1h后即可測得細胞內熒光,熒光的變化量直接反映病毒的復制量。王建東利用熒光素酶基因標記肺癌細胞,并將其接種于嚴重聯合免疫缺陷小鼠皮下,成功建立了穩定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,為肺癌進展、轉移以及藥物敏感性等相關研究奠定了基礎。


朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標記毒性大腸桿菌(ETEC),獲得了GFP基因表達、遺傳穩定的發光標記菌株,為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎。通過ETEc標記的GFP熒光可準確、簡單、快速反應細菌易位率的變化,為益生素篩選、評價提供依據。


3.2在生物科學研究中的應用

3.2.1在分子生物學中的應用熒光素酶基因廣泛應用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉錄調控研究,尤其對低水平表達的調控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,探討HBV轉導后調節序列(HPRE)的功能元件(α,β1,β2)對INF-α作用的影響,HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,而α,β1在INF-α應答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節奏,Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節律性。


Ikawa制作了在肌肉、脾、腎、心臟等器官中表達GFP的轉基因小鼠,表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標記,對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉基因小鼠,大大提高轉基因動物的制作率,減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。


3.2.2在細胞生物學中的應用
R Paulmurugan應用蟲熒光素酶對成肌調節因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網絡、哺乳動物細胞中蛋白質磷酸化提供了一個可靠、快速的方法。


GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態變化、細胞器動力學和內膜系統的運輸、信息轉導、病毒的運動和大分子的運輸等,Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,用激光掃描共聚焦顯微鏡,觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。


3.3監測環境
發光細菌發光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關系,能穩定、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環境樣本中MC結果和HPLC法檢測結果相關性較好,作為一種快速檢測方法,尤其對大批量、低濃度MC水樣的監測有較好的應用前景。于海將發光細菌固定于光纖表面,與光檢測系統結合,開發了一種發光細菌光纖傳感器,用于水中污染物毒性快速監測和評價具有較好的準確性和靈敏度。



3.4檢驗食品

3.4.1色素  
黨亞愛證明17種常用色素對發光細菌均有一定的急性毒性,細菌發光強度與色素毒性呈負相關,發光細菌可簡便、快速檢測色素口。

3.4.2 致癌物 
江敏研究了吲哚、吡啶、喹啉等6種含氮雜環化合物對發光細菌的急性毒性作用。結果表明,發光細菌的相對發光度均隨化合物濃度增加而線性降低,具良好相關性。

3.4.2微生物
高岳利用ATP生物發光技術對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結果與標準細菌培養方法有良好相關性,且不需復雜的設備,可用于食品快速篩選和現場檢測,是一項值得推廣的新技術。

3.4.3檢測農藥殘留
袁東星發現發光細菌發光強度與有機磷農藥濃度呈負相關,可用于現場快速檢測,稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。


4小結與展望

生物發光技術已在生物醫學、農產品、環保等領域中發揮重要作用。相信,隨著研究的進一步深入,它將在理論研究和實際應用中產生更大的價值。摘要:

目的:了解生物發光種類、機理及其在醫學、生物科學、食品、環保等領域的應用。
方法:對有關的文獻中生物發光種類、機理及其在上述領域的具體應用進行綜述。
結果:生物發光有兩類,機理明確,應用廣泛。
結論:生物發光在很多領域的應用日趨廣泛,對其深入了解和研究至關重要。


生物發光是生物發光器在細胞或生物體內發生光能釋放反應的過程。本文簡要介紹生物發光種類、機理及其在醫學、生命科學、食品和環保等領域的應用。


1 種類

生物發光主要有2種:①發生化學或生物學反應后產生的光能信號,主要有含熒光素酶的細菌、真菌、昆蟲等;②被激發后產生的光能信號,主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚、水螅等。


2 機理

2.1熒光素酶
熒光素酶是生物體內催化熒光素或脂肪醛氧化發光的一類酶的總稱。依來源,可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,FL)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,BL)。FL在Mg、ATP、O2的參與下,催化D-熒光素氧化脫羧,產生激活態氧化熒光素,并放出光子,產生550~580nm的熒光。BL以脂肪醛為底物,在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,產生490nm的熒光。


2.2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質內部第65-67位絲氨酸、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環化和氧化形成的,用紫外或藍光激發即能發出肉眼可見的綠色熒光,無需任何底物或輔助因子。


3 應用

生物發光作為一種非放射性、非創傷損害性、高靈敏度、實時動態的檢測技術,在醫學生物學研究、食品及環境檢測等領域應用廣泛。


3.1在生物醫學研究中的應用
生物發光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續動態觀察,在生物醫學領域被廣泛用于致病機理、藥物機制、新藥篩選評價等研究。


熒光素酶被廣泛應用于研究病毒感染、復制、治療。Luker用熒光素酶基因標記牛痘病毒,免疫1h后即可測得細胞內熒光,熒光的變化量直接反映病毒的復制量。王建東利用熒光素酶基因標記肺癌細胞,并將其接種于嚴重聯合免疫缺陷小鼠皮下,成功建立了穩定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,為肺癌進展、轉移以及藥物敏感性等相關研究奠定了基礎。


朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標記毒性大腸桿菌(ETEC),獲得了GFP基因表達、遺傳穩定的發光標記菌株,為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎。通過ETEc標記的GFP熒光可準確、簡單、快速反應細菌易位率的變化,為益生素篩選、評價提供依據。


3.2在生物科學研究中的應用

3.2.1在分子生物學中的應用熒光素酶基因廣泛應用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉錄調控研究,尤其對低水平表達的調控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,探討HBV轉導后調節序列(HPRE)的功能元件(α,β1,β2)對INF-α作用的影響,HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,而α,β1在INF-α應答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節奏,Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節律性。


Ikawa制作了在肌肉、脾、腎、心臟等器官中表達GFP的轉基因小鼠,表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標記,對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉基因小鼠,大大提高轉基因動物的制作率,減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。


3.2.2在細胞生物學中的應用
R Paulmurugan應用蟲熒光素酶對成肌調節因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網絡、哺乳動物細胞中蛋白質磷酸化提供了一個可靠、快速的方法。


GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態變化、細胞器動力學和內膜系統的運輸、信息轉導、病毒的運動和大分子的運輸等,Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,用激光掃描共聚焦顯微鏡,觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。


3.3監測環境
發光細菌發光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關系,能穩定、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環境樣本中MC結果和HPLC法檢測結果相關性較好,作為一種快速檢測方法,尤其對大批量、低濃度MC水樣的監測有較好的應用前景。于海將發光細菌固定于光纖表面,與光檢測系統結合,開發了一種發光細菌光纖傳感器,用于水中污染物毒性快速監測和評價具有較好的準確性和靈敏度。



3.4檢驗食品

3.4.1色素  
黨亞愛證明17種常用色素對發光細菌均有一定的急性毒性,細菌發光強度與色素毒性呈負相關,發光細菌可簡便、快速檢測色素口。

3.4.2 致癌物 
江敏研究了吲哚、吡啶、喹啉等6種含氮雜環化合物對發光細菌的急性毒性作用。結果表明,發光細菌的相對發光度均隨化合物濃度增加而線性降低,具良好相關性。

3.4.2微生物
高岳利用ATP生物發光技術對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結果與標準細菌培養方法有良好相關性,且不需復雜的設備,可用于食品快速篩選和現場檢測,是一項值得推廣的新技術。

3.4.3檢測農藥殘留
袁東星發現發光細菌發光強度與有機磷農藥濃度呈負相關,可用于現場快速檢測,稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。


4小結與展望

生物發光技術已在生物醫學、農產品、環保等領域中發揮重要作用。相信,隨著研究的進一步深入,它將在理論研究和實際應用中產生更大的價值。摘要:

目的:了解生物發光種類、機理及其在醫學、生物科學、食品、環保等領域的應用。
方法:對有關的文獻中生物發光種類、機理及其在上述領域的具體應用進行綜述。
結果:生物發光有兩類,機理明確,應用廣泛。
結論:生物發光在很多領域的應用日趨廣泛,對其深入了解和研究至關重要。


生物發光是生物發光器在細胞或生物體內發生光能釋放反應的過程。本文簡要介紹生物發光種類、機理及其在醫學、生命科學、食品和環保等領域的應用。


1 種類

生物發光主要有2種:①發生化學或生物學反應后產生的光能信號,主要有含熒光素酶的細菌、真菌、昆蟲等;②被激發后產生的光能信號,主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚、水螅等。


2 機理

2.1熒光素酶
熒光素酶是生物體內催化熒光素或脂肪醛氧化發光的一類酶的總稱。依來源,可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,FL)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,BL)。FL在Mg、ATP、O2的參與下,催化D-熒光素氧化脫羧,產生激活態氧化熒光素,并放出光子,產生550~580nm的熒光。BL以脂肪醛為底物,在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,產生490nm的熒光。


2.2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質內部第65-67位絲氨酸、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環化和氧化形成的,用紫外或藍光激發即能發出肉眼可見的綠色熒光,無需任何底物或輔助因子。


3 應用

生物發光作為一種非放射性、非創傷損害性、高靈敏度、實時動態的檢測技術,在醫學生物學研究、食品及環境檢測等領域應用廣泛。


3.1在生物醫學研究中的應用
生物發光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續動態觀察,在生物醫學領域被廣泛用于致病機理、藥物機制、新藥篩選評價等研究。


熒光素酶被廣泛應用于研究病毒感染、復制、治療。Luker用熒光素酶基因標記牛痘病毒,免疫1h后即可測得細胞內熒光,熒光的變化量直接反映病毒的復制量。王建東利用熒光素酶基因標記肺癌細胞,并將其接種于嚴重聯合免疫缺陷小鼠皮下,成功建立了穩定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,為肺癌進展、轉移以及藥物敏感性等相關研究奠定了基礎。


朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標記毒性大腸桿菌(ETEC),獲得了GFP基因表達、遺傳穩定的發光標記菌株,為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎。通過ETEc標記的GFP熒光可準確、簡單、快速反應細菌易位率的變化,為益生素篩選、評價提供依據。


3.2在生物科學研究中的應用

3.2.1在分子生物學中的應用熒光素酶基因廣泛應用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉錄調控研究,尤其對低水平表達的調控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,探討HBV轉導后調節序列(HPRE)的功能元件(α,β1,β2)對INF-α作用的影響,HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,而α,β1在INF-α應答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節奏,Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節律性。


Ikawa制作了在肌肉、脾、腎、心臟等器官中表達GFP的轉基因小鼠,表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標記,對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉基因小鼠,大大提高轉基因動物的制作率,減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。


3.2.2在細胞生物學中的應用
R Paulmurugan應用蟲熒光素酶對成肌調節因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網絡、哺乳動物細胞中蛋白質磷酸化提供了一個可靠、快速的方法。


GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態變化、細胞器動力學和內膜系統的運輸、信息轉導、病毒的運動和大分子的運輸等,Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,用激光掃描共聚焦顯微鏡,觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。


3.3監測環境
發光細菌發光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關系,能穩定、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環境樣本中MC結果和HPLC法檢測結果相關性較好,作為一種快速檢測方法,尤其對大批量、低濃度MC水樣的監測有較好的應用前景。于海將發光細菌固定于光纖表面,與光檢測系統結合,開發了一種發光細菌光纖傳感器,用于水中污染物毒性快速監測和評價具有較好的準確性和靈敏度。



3.4檢驗食品

3.4.1色素  
黨亞愛證明17種常用色素對發光細菌均有一定的急性毒性,細菌發光強度與色素毒性呈負相關,發光細菌可簡便、快速檢測色素口。

3.4.2 致癌物 
江敏研究了吲哚、吡啶、喹啉等6種含氮雜環化合物對發光細菌的急性毒性作用。結果表明,發光細菌的相對發光度均隨化合物濃度增加而線性降低,具良好相關性。

3.4.2微生物
高岳利用ATP生物發光技術對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結果與標準細菌培養方法有良好相關性,且不需復雜的設備,可用于食品快速篩選和現場檢測,是一項值得推廣的新技術。

3.4.3檢測農藥殘留
袁東星發現發光細菌發光強度與有機磷農藥濃度呈負相關,可用于現場快速檢測,稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。


4小結與展望

生物發光技術已在生物醫學、農產品、環保等領域中發揮重要作用。相信,隨著研究的進一步深入,它將在理論研究和實際應用中產生更大的價值。摘要:

目的:了解生物發光種類、機理及其在醫學、生物科學、食品、環保等領域的應用。
方法:對有關的文獻中生物發光種類、機理及其在上述領域的具體應用進行綜述。
結果:生物發光有兩類,機理明確,應用廣泛。
結論:生物發光在很多領域的應用日趨廣泛,對其深入了解和研究至關重要。


生物發光是生物發光器在細胞或生物體內發生光能釋放反應的過程。本文簡要介紹生物發光種類、機理及其在醫學、生命科學、食品和環保等領域的應用。


1 種類

生物發光主要有2種:①發生化學或生物學反應后產生的光能信號,主要有含熒光素酶的細菌、真菌、昆蟲等;②被激發后產生的光能信號,主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚、水螅等。


2 機理

2.1熒光素酶
熒光素酶是生物體內催化熒光素或脂肪醛氧化發光的一類酶的總稱。依來源,可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,FL)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,BL)。FL在Mg、ATP、O2的參與下,催化D-熒光素氧化脫羧,產生激活態氧化熒光素,并放出光子,產生550~580nm的熒光。BL以脂肪醛為底物,在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,產生490nm的熒光。


2.2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質內部第65-67位絲氨酸、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環化和氧化形成的,用紫外或藍光激發即能發出肉眼可見的綠色熒光,無需任何底物或輔助因子。


3 應用

生物發光作為一種非放射性、非創傷損害性、高靈敏度、實時動態的檢測技術,在醫學生物學研究、食品及環境檢測等領域應用廣泛。


3.1在生物醫學研究中的應用
生物發光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續動態觀察,在生物醫學領域被廣泛用于致病機理、藥物機制、新藥篩選評價等研究。


熒光素酶被廣泛應用于研究病毒感染、復制、治療。Luker用熒光素酶基因標記牛痘病毒,免疫1h后即可測得細胞內熒光,熒光的變化量直接反映病毒的復制量。王建東利用熒光素酶基因標記肺癌細胞,并將其接種于嚴重聯合免疫缺陷小鼠皮下,成功建立了穩定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,為肺癌進展、轉移以及藥物敏感性等相關研究奠定了基礎。


朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標記毒性大腸桿菌(ETEC),獲得了GFP基因表達、遺傳穩定的發光標記菌株,為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎。通過ETEc標記的GFP熒光可準確、簡單、快速反應細菌易位率的變化,為益生素篩選、評價提供依據。


3.2在生物科學研究中的應用

3.2.1在分子生物學中的應用熒光素酶基因廣泛應用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉錄調控研究,尤其對低水平表達的調控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,探討HBV轉導后調節序列(HPRE)的功能元件(α,β1,β2)對INF-α作用的影響,HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,而α,β1在INF-α應答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節奏,Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節律性。


Ikawa制作了在肌肉、脾、腎、心臟等器官中表達GFP的轉基因小鼠,表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標記,對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉基因小鼠,大大提高轉基因動物的制作率,減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。


3.2.2在細胞生物學中的應用
R Paulmurugan應用蟲熒光素酶對成肌調節因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網絡、哺乳動物細胞中蛋白質磷酸化提供了一個可靠、快速的方法。


GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態變化、細胞器動力學和內膜系統的運輸、信息轉導、病毒的運動和大分子的運輸等,Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,用激光掃描共聚焦顯微鏡,觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。


3.3監測環境
發光細菌發光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關系,能穩定、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環境樣本中MC結果和HPLC法檢測結果相關性較好,作為一種快速檢測方法,尤其對大批量、低濃度MC水樣的監測有較好的應用前景。于海將發光細菌固定于光纖表面,與光檢測系統結合,開發了一種發光細菌光纖傳感器,用于水中污染物毒性快速監測和評價具有較好的準確性和靈敏度。



3.4檢驗食品

3.4.1色素  
黨亞愛證明17種常用色素對發光細菌均有一定的急性毒性,細菌發光強度與色素毒性呈負相關,發光細菌可簡便、快速檢測色素口。

3.4.2 致癌物 
江敏研究了吲哚、吡啶、喹啉等6種含氮雜環化合物對發光細菌的急性毒性作用。結果表明,發光細菌的相對發光度均隨化合物濃度增加而線性降低,具良好相關性。

3.4.2微生物
高岳利用ATP生物發光技術對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結果與標準細菌培養方法有良好相關性,且不需復雜的設備,可用于食品快速篩選和現場檢測,是一項值得推廣的新技術。

3.4.3檢測農藥殘留
袁東星發現發光細菌發光強度與有機磷農藥濃度呈負相關,可用于現場快速檢測,稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。


4小結與展望

生物發光技術已在生物醫學、農產品、環保等領域中發揮重要作用。相信,隨著研究的進一步深入,它將在理論研究和實際應用中產生更大的價值。摘要:

目的:了解生物發光種類、機理及其在醫學、生物科學、食品、環保等領域的應用。
方法:對有關的文獻中生物發光種類、機理及其在上述領域的具體應用進行綜述。
結果:生物發光有兩類,機理明確,應用廣泛。
結論:生物發光在很多領域的應用日趨廣泛,對其深入了解和研究至關重要。


生物發光是生物發光器在細胞或生物體內發生光能釋放反應的過程。本文簡要介紹生物發光種類、機理及其在醫學、生命科學、食品和環保等領域的應用。


1 種類

生物發光主要有2種:①發生化學或生物學反應后產生的光能信號,主要有含熒光素酶的細菌、真菌、昆蟲等;②被激發后產生的光能信號,主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚、水螅等。


2 機理

2.1熒光素酶
熒光素酶是生物體內催化熒光素或脂肪醛氧化發光的一類酶的總稱。依來源,可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,FL)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,BL)。FL在Mg、ATP、O2的參與下,催化D-熒光素氧化脫羧,產生激活態氧化熒光素,并放出光子,產生550~580nm的熒光。BL以脂肪醛為底物,在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,產生490nm的熒光。


2.2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質內部第65-67位絲氨酸、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環化和氧化形成的,用紫外或藍光激發即能發出肉眼可見的綠色熒光,無需任何底物或輔助因子。


3 應用

生物發光作為一種非放射性、非創傷損害性、高靈敏度、實時動態的檢測技術,在醫學生物學研究、食品及環境檢測等領域應用廣泛。


3.1在生物醫學研究中的應用
生物發光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續動態觀察,在生物醫學領域被廣泛用于致病機理、藥物機制、新藥篩選評價等研究。


熒光素酶被廣泛應用于研究病毒感染、復制、治療。Luker用熒光素酶基因標記牛痘病毒,免疫1h后即可測得細胞內熒光,熒光的變化量直接反映病毒的復制量。王建東利用熒光素酶基因標記肺癌細胞,并將其接種于嚴重聯合免疫缺陷小鼠皮下,成功建立了穩定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,為肺癌進展、轉移以及藥物敏感性等相關研究奠定了基礎。


朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標記毒性大腸桿菌(ETEC),獲得了GFP基因表達、遺傳穩定的發光標記菌株,為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎。通過ETEc標記的GFP熒光可準確、簡單、快速反應細菌易位率的變化,為益生素篩選、評價提供依據。


3.2在生物科學研究中的應用

3.2.1在分子生物學中的應用熒光素酶基因廣泛應用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉錄調控研究,尤其對低水平表達的調控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,探討HBV轉導后調節序列(HPRE)的功能元件(α,β1,β2)對INF-α作用的影響,HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,而α,β1在INF-α應答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節奏,Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節律性。


Ikawa制作了在肌肉、脾、腎、心臟等器官中表達GFP的轉基因小鼠,表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標記,對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉基因小鼠,大大提高轉基因動物的制作率,減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。


3.2.2在細胞生物學中的應用
R Paulmurugan應用蟲熒光素酶對成肌調節因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網絡、哺乳動物細胞中蛋白質磷酸化提供了一個可靠、快速的方法。


GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態變化、細胞器動力學和內膜系統的運輸、信息轉導、病毒的運動和大分子的運輸等,Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,用激光掃描共聚焦顯微鏡,觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。


3.3監測環境
發光細菌發光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關系,能穩定、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環境樣本中MC結果和HPLC法檢測結果相關性較好,作為一種快速檢測方法,尤其對大批量、低濃度MC水樣的監測有較好的應用前景。于海將發光細菌固定于光纖表面,與光檢測系統結合,開發了一種發光細菌光纖傳感器,用于水中污染物毒性快速監測和評價具有較好的準確性和靈敏度。



3.4檢驗食品

3.4.1色素  
黨亞愛證明17種常用色素對發光細菌均有一定的急性毒性,細菌發光強度與色素毒性呈負相關,發光細菌可簡便、快速檢測色素口。

3.4.2 致癌物 
江敏研究了吲哚、吡啶、喹啉等6種含氮雜環化合物對發光細菌的急性毒性作用。結果表明,發光細菌的相對發光度均隨化合物濃度增加而線性降低,具良好相關性。

3.4.2微生物
高岳利用ATP生物發光技術對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結果與標準細菌培養方法有良好相關性,且不需復雜的設備,可用于食品快速篩選和現場檢測,是一項值得推廣的新技術。

3.4.3檢測農藥殘留
袁東星發現發光細菌發光強度與有機磷農藥濃度呈負相關,可用于現場快速檢測,稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。


4小結與展望

生物發光技術已在生物醫學、農產品、環保等領域中發揮重要作用。相信,隨著研究的進一步深入,它將在理論研究和實際應用中產生更大的價值。摘要:

目的:了解生物發光種類、機理及其在醫學、生物科學、食品、環保等領域的應用。
方法:對有關的文獻中生物發光種類、機理及其在上述領域的具體應用進行綜述。
結果:生物發光有兩類,機理明確,應用廣泛。
結論:生物發光在很多領域的應用日趨廣泛,對其深入了解和研究至關重要。


生物發光是生物發光器在細胞或生物體內發生光能釋放反應的過程。本文簡要介紹生物發光種類、機理及其在醫學、生命科學、食品和環保等領域的應用。


1 種類

生物發光主要有2種:①發生化學或生物學反應后產生的光能信號,主要有含熒光素酶的細菌、真菌、昆蟲等;②被激發后產生的光能信號,主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚、水螅等。


2 機理

2.1熒光素酶
熒光素酶是生物體內催化熒光素或脂肪醛氧化發光的一類酶的總稱。依來源,可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,FL)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,BL)。FL在Mg、ATP、O2的參與下,催化D-熒光素氧化脫羧,產生激活態氧化熒光素,并放出光子,產生550~580nm的熒光。BL以脂肪醛為底物,在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,產生490nm的熒光。


2.2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質內部第65-67位絲氨酸、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環化和氧化形成的,用紫外或藍光激發即能發出肉眼可見的綠色熒光,無需任何底物或輔助因子。


3 應用

生物發光作為一種非放射性、非創傷損害性、高靈敏度、實時動態的檢測技術,在醫學生物學研究、食品及環境檢測等領域應用廣泛。


3.1在生物醫學研究中的應用
生物發光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續動態觀察,在生物醫學領域被廣泛用于致病機理、藥物機制、新藥篩選評價等研究。


熒光素酶被廣泛應用于研究病毒感染、復制、治療。Luker用熒光素酶基因標記牛痘病毒,免疫1h后即可測得細胞內熒光,熒光的變化量直接反映病毒的復制量。王建東利用熒光素酶基因標記肺癌細胞,并將其接種于嚴重聯合免疫缺陷小鼠皮下,成功建立了穩定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,為肺癌進展、轉移以及藥物敏感性等相關研究奠定了基礎。


朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標記毒性大腸桿菌(ETEC),獲得了GFP基因表達、遺傳穩定的發光標記菌株,為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎。通過ETEc標記的GFP熒光可準確、簡單、快速反應細菌易位率的變化,為益生素篩選、評價提供依據。


3.2在生物科學研究中的應用

3.2.1在分子生物學中的應用熒光素酶基因廣泛應用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉錄調控研究,尤其對低水平表達的調控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,探討HBV轉導后調節序列(HPRE)的功能元件(α,β1,β2)對INF-α作用的影響,HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,而α,β1在INF-α應答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節奏,Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節律性。


Ikawa制作了在肌肉、脾、腎、心臟等器官中表達GFP的轉基因小鼠,表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標記,對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉基因小鼠,大大提高轉基因動物的制作率,減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。


3.2.2在細胞生物學中的應用
R Paulmurugan應用蟲熒光素酶對成肌調節因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網絡、哺乳動物細胞中蛋白質磷酸化提供了一個可靠、快速的方法。


GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態變化、細胞器動力學和內膜系統的運輸、信息轉導、病毒的運動和大分子的運輸等,Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,用激光掃描共聚焦顯微鏡,觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。


3.3監測環境
發光細菌發光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關系,能穩定、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環境樣本中MC結果和HPLC法檢測結果相關性較好,作為一種快速檢測方法,尤其對大批量、低濃度MC水樣的監測有較好的應用前景。于海將發光細菌固定于光纖表面,與光檢測系統結合,開發了一種發光細菌光纖傳感器,用于水中污染物毒性快速監測和評價具有較好的準確性和靈敏度。



3.4檢驗食品

3.4.1色素  
黨亞愛證明17種常用色素對發光細菌均有一定的急性毒性,細菌發光強度與色素毒性呈負相關,發光細菌可簡便、快速檢測色素口。

3.4.2 致癌物 
江敏研究了吲哚、吡啶、喹啉等6種含氮雜環化合物對發光細菌的急性毒性作用。結果表明,發光細菌的相對發光度均隨化合物濃度增加而線性降低,具良好相關性。

3.4.2微生物
高岳利用ATP生物發光技術對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結果與標準細菌培養方法有良好相關性,且不需復雜的設備,可用于食品快速篩選和現場檢測,是一項值得推廣的新技術。

3.4.3檢測農藥殘留
袁東星發現發光細菌發光強度與有機磷農藥濃度呈負相關,可用于現場快速檢測,稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。


4小結與展望

生物發光技術已在生物醫學、農產品、環保等領域中發揮重要作用。相信,隨著研究的進一步深入,它將在理論研究和實際應用中產生更大的價值。摘要:

目的:了解生物發光種類、機理及其在醫學、生物科學、食品、環保等領域的應用。
方法:對有關的文獻中生物發光種類、機理及其在上述領域的具體應用進行綜述。
結果:生物發光有兩類,機理明確,應用廣泛。
結論:生物發光在很多領域的應用日趨廣泛,對其深入了解和研究至關重要。


生物發光是生物發光器在細胞或生物體內發生光能釋放反應的過程。本文簡要介紹生物發光種類、機理及其在醫學、生命科學、食品和環保等領域的應用。


1 種類

生物發光主要有2種:①發生化學或生物學反應后產生的光能信號,主要有含熒光素酶的細菌、真菌、昆蟲等;②被激發后產生的光能信號,主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚、水螅等。


2 機理

2.1熒光素酶
熒光素酶是生物體內催化熒光素或脂肪醛氧化發光的一類酶的總稱。依來源,可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,FL)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,BL)。FL在Mg、ATP、O2的參與下,催化D-熒光素氧化脫羧,產生激活態氧化熒光素,并放出光子,產生550~580nm的熒光。BL以脂肪醛為底物,在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,產生490nm的熒光。


2.2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質內部第65-67位絲氨酸、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環化和氧化形成的,用紫外或藍光激發即能發出肉眼可見的綠色熒光,無需任何底物或輔助因子。


3 應用

生物發光作為一種非放射性、非創傷損害性、高靈敏度、實時動態的檢測技術,在醫學生物學研究、食品及環境檢測等領域應用廣泛。


3.1在生物醫學研究中的應用
生物發光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續動態觀察,在生物醫學領域被廣泛用于致病機理、藥物機制、新藥篩選評價等研究。


熒光素酶被廣泛應用于研究病毒感染、復制、治療。Luker用熒光素酶基因標記牛痘病毒,免疫1h后即可測得細胞內熒光,熒光的變化量直接反映病毒的復制量。王建東利用熒光素酶基因標記肺癌細胞,并將其接種于嚴重聯合免疫缺陷小鼠皮下,成功建立了穩定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,為肺癌進展、轉移以及藥物敏感性等相關研究奠定了基礎。


朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標記毒性大腸桿菌(ETEC),獲得了GFP基因表達、遺傳穩定的發光標記菌株,為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎。通過ETEc標記的GFP熒光可準確、簡單、快速反應細菌易位率的變化,為益生素篩選、評價提供依據。


3.2在生物科學研究中的應用

3.2.1在分子生物學中的應用熒光素酶基因廣泛應用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉錄調控研究,尤其對低水平表達的調控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,探討HBV轉導后調節序列(HPRE)的功能元件(α,β1,β2)對INF-α作用的影響,HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,而α,β1在INF-α應答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節奏,Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節律性。


Ikawa制作了在肌肉、脾、腎、心臟等器官中表達GFP的轉基因小鼠,表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標記,對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉基因小鼠,大大提高轉基因動物的制作率,減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。


3.2.2在細胞生物學中的應用
R Paulmurugan應用蟲熒光素酶對成肌調節因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網絡、哺乳動物細胞中蛋白質磷酸化提供了一個可靠、快速的方法。


GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態變化、細胞器動力學和內膜系統的運輸、信息轉導、病毒的運動和大分子的運輸等,Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,用激光掃描共聚焦顯微鏡,觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。


3.3監測環境
發光細菌發光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關系,能穩定、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環境樣本中MC結果和HPLC法檢測結果相關性較好,作為一種快速檢測方法,尤其對大批量、低濃度MC水樣的監測有較好的應用前景。于海將發光細菌固定于光纖表面,與光檢測系統結合,開發了一種發光細菌光纖傳感器,用于水中污染物毒性快速監測和評價具有較好的準確性和靈敏度。



3.4檢驗食品

3.4.1色素  
黨亞愛證明17種常用色素對發光細菌均有一定的急性毒性,細菌發光強度與色素毒性呈負相關,發光細菌可簡便、快速檢測色素口。

3.4.2 致癌物 
江敏研究了吲哚、吡啶、喹啉等6種含氮雜環化合物對發光細菌的急性毒性作用。結果表明,發光細菌的相對發光度均隨化合物濃度增加而線性降低,具良好相關性。

3.4.2微生物
高岳利用ATP生物發光技術對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結果與標準細菌培養方法有良好相關性,且不需復雜的設備,可用于食品快速篩選和現場檢測,是一項值得推廣的新技術。

3.4.3檢測農藥殘留
袁東星發現發光細菌發光強度與有機磷農藥濃度呈負相關,可用于現場快速檢測,稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。


4小結與展望

生物發光技術已在生物醫學、農產品、環保等領域中發揮重要作用。相信,隨著研究的進一步深入,它將在理論研究和實際應用中產生更大的價值。摘要:

目的:了解生物發光種類、機理及其在醫學、生物科學、食品、環保等領域的應用。
方法:對有關的文獻中生物發光種類、機理及其在上述領域的具體應用進行綜述。
結果:生物發光有兩類,機理明確,應用廣泛。
結論:生物發光在很多領域的應用日趨廣泛,對其深入了解和研究至關重要。


生物發光是生物發光器在細胞或生物體內發生光能釋放反應的過程。本文簡要介紹生物發光種類、機理及其在醫學、生命科學、食品和環保等領域的應用。


1 種類

生物發光主要有2種:①發生化學或生物學反應后產生的光能信號,主要有含熒光素酶的細菌、真菌、昆蟲等;②被激發后產生的光能信號,主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚、水螅等。


2 機理

2.1熒光素酶
熒光素酶是生物體內催化熒光素或脂肪醛氧化發光的一類酶的總稱。依來源,可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,FL)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,BL)。FL在Mg、ATP、O2的參與下,催化D-熒光素氧化脫羧,產生激活態氧化熒光素,并放出光子,產生550~580nm的熒光。BL以脂肪醛為底物,在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,產生490nm的熒光。


2.2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質內部第65-67位絲氨酸、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環化和氧化形成的,用紫外或藍光激發即能發出肉眼可見的綠色熒光,無需任何底物或輔助因子。


3 應用

生物發光作為一種非放射性、非創傷損害性、高靈敏度、實時動態的檢測技術,在醫學生物學研究、食品及環境檢測等領域應用廣泛。


3.1在生物醫學研究中的應用
生物發光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續動態觀察,在生物醫學領域被廣泛用于致病機理、藥物機制、新藥篩選評價等研究。


熒光素酶被廣泛應用于研究病毒感染、復制、治療。Luker用熒光素酶基因標記牛痘病毒,免疫1h后即可測得細胞內熒光,熒光的變化量直接反映病毒的復制量。王建東利用熒光素酶基因標記肺癌細胞,并將其接種于嚴重聯合免疫缺陷小鼠皮下,成功建立了穩定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,為肺癌進展、轉移以及藥物敏感性等相關研究奠定了基礎。


朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標記毒性大腸桿菌(ETEC),獲得了GFP基因表達、遺傳穩定的發光標記菌株,為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎。通過ETEc標記的GFP熒光可準確、簡單、快速反應細菌易位率的變化,為益生素篩選、評價提供依據。


3.2在生物科學研究中的應用

3.2.1在分子生物學中的應用熒光素酶基因廣泛應用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉錄調控研究,尤其對低水平表達的調控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,探討HBV轉導后調節序列(HPRE)的功能元件(α,β1,β2)對INF-α作用的影響,HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,而α,β1在INF-α應答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節奏,Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節律性。


Ikawa制作了在肌肉、脾、腎、心臟等器官中表達GFP的轉基因小鼠,表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標記,對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉基因小鼠,大大提高轉基因動物的制作率,減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。


3.2.2在細胞生物學中的應用
R Paulmurugan應用蟲熒光素酶對成肌調節因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網絡、哺乳動物細胞中蛋白質磷酸化提供了一個可靠、快速的方法。


GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態變化、細胞器動力學和內膜系統的運輸、信息轉導、病毒的運動和大分子的運輸等,Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,用激光掃描共聚焦顯微鏡,觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。


3.3監測環境
發光細菌發光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關系,能穩定、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環境樣本中MC結果和HPLC法檢測結果相關性較好,作為一種快速檢測方法,尤其對大批量、低濃度MC水樣的監測有較好的應用前景。于海將發光細菌固定于光纖表面,與光檢測系統結合,開發了一種發光細菌光纖傳感器,用于水中污染物毒性快速監測和評價具有較好的準確性和靈敏度。



3.4檢驗食品

3.4.1色素  
黨亞愛證明17種常用色素對發光細菌均有一定的急性毒性,細菌發光強度與色素毒性呈負相關,發光細菌可簡便、快速檢測色素口。

3.4.2 致癌物 
江敏研究了吲哚、吡啶、喹啉等6種含氮雜環化合物對發光細菌的急性毒性作用。結果表明,發光細菌的相對發光度均隨化合物濃度增加而線性降低,具良好相關性。

3.4.2微生物
高岳利用ATP生物發光技術對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結果與標準細菌培養方法有良好相關性,且不需復雜的設備,可用于食品快速篩選和現場檢測,是一項值得推廣的新技術。

3.4.3檢測農藥殘留
袁東星發現發光細菌發光強度與有機磷農藥濃度呈負相關,可用于現場快速檢測,稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。


4小結與展望

生物發光技術已在生物醫學、農產品、環保等領域中發揮重要作用。相信,隨著研究的進一步深入,它將在理論研究和實際應用中產生更大的價值。摘要:

目的:了解生物發光種類、機理及其在醫學、生物科學、食品、環保等領域的應用。
方法:對有關的文獻中生物發光種類、機理及其在上述領域的具體應用進行綜述。
結果:生物發光有兩類,機理明確,應用廣泛。
結論:生物發光在很多領域的應用日趨廣泛,對其深入了解和研究至關重要。


生物發光是生物發光器在細胞或生物體內發生光能釋放反應的過程。本文簡要介紹生物發光種類、機理及其在醫學、生命科學、食品和環保等領域的應用。


1 種類

生物發光主要有2種:①發生化學或生物學反應后產生的光能信號,主要有含熒光素酶的細菌、真菌、昆蟲等;②被激發后產生的光能信號,主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚、水螅等。


2 機理

2.1熒光素酶
熒光素酶是生物體內催化熒光素或脂肪醛氧化發光的一類酶的總稱。依來源,可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,FL)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,BL)。FL在Mg、ATP、O2的參與下,催化D-熒光素氧化脫羧,產生激活態氧化熒光素,并放出光子,產生550~580nm的熒光。BL以脂肪醛為底物,在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,產生490nm的熒光。


2.2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質內部第65-67位絲氨酸、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環化和氧化形成的,用紫外或藍光激發即能發出肉眼可見的綠色熒光,無需任何底物或輔助因子。


3 應用

生物發光作為一種非放射性、非創傷損害性、高靈敏度、實時動態的檢測技術,在醫學生物學研究、食品及環境檢測等領域應用廣泛。


3.1在生物醫學研究中的應用
生物發光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續動態觀察,在生物醫學領域被廣泛用于致病機理、藥物機制、新藥篩選評價等研究。


熒光素酶被廣泛應用于研究病毒感染、復制、治療。Luker用熒光素酶基因標記牛痘病毒,免疫1h后即可測得細胞內熒光,熒光的變化量直接反映病毒的復制量。王建東利用熒光素酶基因標記肺癌細胞,并將其接種于嚴重聯合免疫缺陷小鼠皮下,成功建立了穩定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,為肺癌進展、轉移以及藥物敏感性等相關研究奠定了基礎。


朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標記毒性大腸桿菌(ETEC),獲得了GFP基因表達、遺傳穩定的發光標記菌株,為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎。通過ETEc標記的GFP熒光可準確、簡單、快速反應細菌易位率的變化,為益生素篩選、評價提供依據。


3.2在生物科學研究中的應用

3.2.1在分子生物學中的應用熒光素酶基因廣泛應用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉錄調控研究,尤其對低水平表達的調控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,探討HBV轉導后調節序列(HPRE)的功能元件(α,β1,β2)對INF-α作用的影響,HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,而α,β1在INF-α應答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節奏,Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節律性。


Ikawa制作了在肌肉、脾、腎、心臟等器官中表達GFP的轉基因小鼠,表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標記,對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉基因小鼠,大大提高轉基因動物的制作率,減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。


3.2.2在細胞生物學中的應用
R Paulmurugan應用蟲熒光素酶對成肌調節因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網絡、哺乳動物細胞中蛋白質磷酸化提供了一個可靠、快速的方法。


GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態變化、細胞器動力學和內膜系統的運輸、信息轉導、病毒的運動和大分子的運輸等,Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,用激光掃描共聚焦顯微鏡,觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。


3.3監測環境
發光細菌發光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關系,能穩定、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環境樣本中MC結果和HPLC法檢測結果相關性較好,作為一種快速檢測方法,尤其對大批量、低濃度MC水樣的監測有較好的應用前景。于海將發光細菌固定于光纖表面,與光檢測系統結合,開發了一種發光細菌光纖傳感器,用于水中污染物毒性快速監測和評價具有較好的準確性和靈敏度。



3.4檢驗食品

3.4.1色素  
黨亞愛證明17種常用色素對發光細菌均有一定的急性毒性,細菌發光強度與色素毒性呈負相關,發光細菌可簡便、快速檢測色素口。

3.4.2 致癌物 
江敏研究了吲哚、吡啶、喹啉等6種含氮雜環化合物對發光細菌的急性毒性作用。結果表明,發光細菌的相對發光度均隨化合物濃度增加而線性降低,具良好相關性。

3.4.2微生物
高岳利用ATP生物發光技術對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結果與標準細菌培養方法有良好相關性,且不需復雜的設備,可用于食品快速篩選和現場檢測,是一項值得推廣的新技術。

3.4.3檢測農藥殘留
袁東星發現發光細菌發光強度與有機磷農藥濃度呈負相關,可用于現場快速檢測,稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。


4小結與展望

生物發光技術已在生物醫學、農產品、環保等領域中發揮重要作用。相信,隨著研究的進一步深入,它將在理論研究和實際應用中產生更大的價值。摘要:

目的:了解生物發光種類、機理及其在醫學、生物科學、食品、環保等領域的應用。
方法:對有關的文獻中生物發光種類、機理及其在上述領域的具體應用進行綜述。
結果:生物發光有兩類,機理明確,應用廣泛。
結論:生物發光在很多領域的應用日趨廣泛,對其深入了解和研究至關重要。


生物發光是生物發光器在細胞或生物體內發生光能釋放反應的過程。本文簡要介紹生物發光種類、機理及其在醫學、生命科學、食品和環保等領域的應用。


1 種類

生物發光主要有2種:①發生化學或生物學反應后產生的光能信號,主要有含熒光素酶的細菌、真菌、昆蟲等;②被激發后產生的光能信號,主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚、水螅等。


2 機理

2.1熒光素酶
熒光素酶是生物體內催化熒光素或脂肪醛氧化發光的一類酶的總稱。依來源,可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,FL)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,BL)。FL在Mg、ATP、O2的參與下,催化D-熒光素氧化脫羧,產生激活態氧化熒光素,并放出光子,產生550~580nm的熒光。BL以脂肪醛為底物,在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,產生490nm的熒光。


2.2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質內部第65-67位絲氨酸、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環化和氧化形成的,用紫外或藍光激發即能發出肉眼可見的綠色熒光,無需任何底物或輔助因子。


3 應用

生物發光作為一種非放射性、非創傷損害性、高靈敏度、實時動態的檢測技術,在醫學生物學研究、食品及環境檢測等領域應用廣泛。


3.1在生物醫學研究中的應用
生物發光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續動態觀察,在生物醫學領域被廣泛用于致病機理、藥物機制、新藥篩選評價等研究。


熒光素酶被廣泛應用于研究病毒感染、復制、治療。Luker用熒光素酶基因標記牛痘病毒,免疫1h后即可測得細胞內熒光,熒光的變化量直接反映病毒的復制量。王建東利用熒光素酶基因標記肺癌細胞,并將其接種于嚴重聯合免疫缺陷小鼠皮下,成功建立了穩定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,為肺癌進展、轉移以及藥物敏感性等相關研究奠定了基礎。


朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標記毒性大腸桿菌(ETEC),獲得了GFP基因表達、遺傳穩定的發光標記菌株,為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎。通過ETEc標記的GFP熒光可準確、簡單、快速反應細菌易位率的變化,為益生素篩選、評價提供依據。


3.2在生物科學研究中的應用

3.2.1在分子生物學中的應用熒光素酶基因廣泛應用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉錄調控研究,尤其對低水平表達的調控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,探討HBV轉導后調節序列(HPRE)的功能元件(α,β1,β2)對INF-α作用的影響,HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,而α,β1在INF-α應答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節奏,Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節律性。


Ikawa制作了在肌肉、脾、腎、心臟等器官中表達GFP的轉基因小鼠,表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標記,對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉基因小鼠,大大提高轉基因動物的制作率,減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。


3.2.2在細胞生物學中的應用
R Paulmurugan應用蟲熒光素酶對成肌調節因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網絡、哺乳動物細胞中蛋白質磷酸化提供了一個可靠、快速的方法。


GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態變化、細胞器動力學和內膜系統的運輸、信息轉導、病毒的運動和大分子的運輸等,Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,用激光掃描共聚焦顯微鏡,觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。


3.3監測環境
發光細菌發光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關系,能穩定、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環境樣本中MC結果和HPLC法檢測結果相關性較好,作為一種快速檢測方法,尤其對大批量、低濃度MC水樣的監測有較好的應用前景。于海將發光細菌固定于光纖表面,與光檢測系統結合,開發了一種發光細菌光纖傳感器,用于水中污染物毒性快速監測和評價具有較好的準確性和靈敏度。



3.4檢驗食品

3.4.1色素  
黨亞愛證明17種常用色素對發光細菌均有一定的急性毒性,細菌發光強度與色素毒性呈負相關,發光細菌可簡便、快速檢測色素口。

3.4.2 致癌物 
江敏研究了吲哚、吡啶、喹啉等6種含氮雜環化合物對發光細菌的急性毒性作用。結果表明,發光細菌的相對發光度均隨化合物濃度增加而線性降低,具良好相關性。

3.4.2微生物
高岳利用ATP生物發光技術對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結果與標準細菌培養方法有良好相關性,且不需復雜的設備,可用于食品快速篩選和現場檢測,是一項值得推廣的新技術。

3.4.3檢測農藥殘留
袁東星發現發光細菌發光強度與有機磷農藥濃度呈負相關,可用于現場快速檢測,稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。


4小結與展望

生物發光技術已在生物醫學、農產品、環保等領域中發揮重要作用。相信,隨著研究的進一步深入,它將在理論研究和實際應用中產生更大的價值。摘要:

目的:了解生物發光種類、機理及其在醫學、生物科學、食品、環保等領域的應用。
方法:對有關的文獻中生物發光種類、機理及其在上述領域的具體應用進行綜述。
結果:生物發光有兩類,機理明確,應用廣泛。
結論:生物發光在很多領域的應用日趨廣泛,對其深入了解和研究至關重要。


生物發光是生物發光器在細胞或生物體內發生光能釋放反應的過程。本文簡要介紹生物發光種類、機理及其在醫學、生命科學、食品和環保等領域的應用。


1 種類

生物發光主要有2種:①發生化學或生物學反應后產生的光能信號,主要有含熒光素酶的細菌、真菌、昆蟲等;②被激發后產生的光能信號,主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚、水螅等。


2 機理

2.1熒光素酶
熒光素酶是生物體內催化熒光素或脂肪醛氧化發光的一類酶的總稱。依來源,可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,FL)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,BL)。FL在Mg、ATP、O2的參與下,催化D-熒光素氧化脫羧,產生激活態氧化熒光素,并放出光子,產生550~580nm的熒光。BL以脂肪醛為底物,在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,產生490nm的熒光。


2.2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質內部第65-67位絲氨酸、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環化和氧化形成的,用紫外或藍光激發即能發出肉眼可見的綠色熒光,無需任何底物或輔助因子。


3 應用

生物發光作為一種非放射性、非創傷損害性、高靈敏度、實時動態的檢測技術,在醫學生物學研究、食品及環境檢測等領域應用廣泛。


3.1在生物醫學研究中的應用
生物發光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續動態觀察,在生物醫學領域被廣泛用于致病機理、藥物機制、新藥篩選評價等研究。


熒光素酶被廣泛應用于研究病毒感染、復制、治療。Luker用熒光素酶基因標記牛痘病毒,免疫1h后即可測得細胞內熒光,熒光的變化量直接反映病毒的復制量。王建東利用熒光素酶基因標記肺癌細胞,并將其接種于嚴重聯合免疫缺陷小鼠皮下,成功建立了穩定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,為肺癌進展、轉移以及藥物敏感性等相關研究奠定了基礎。


朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標記毒性大腸桿菌(ETEC),獲得了GFP基因表達、遺傳穩定的發光標記菌株,為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎。通過ETEc標記的GFP熒光可準確、簡單、快速反應細菌易位率的變化,為益生素篩選、評價提供依據。


3.2在生物科學研究中的應用

3.2.1在分子生物學中的應用熒光素酶基因廣泛應用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉錄調控研究,尤其對低水平表達的調控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,探討HBV轉導后調節序列(HPRE)的功能元件(α,β1,β2)對INF-α作用的影響,HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,而α,β1在INF-α應答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節奏,Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節律性。


Ikawa制作了在肌肉、脾、腎、心臟等器官中表達GFP的轉基因小鼠,表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標記,對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉基因小鼠,大大提高轉基因動物的制作率,減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。


3.2.2在細胞生物學中的應用
R Paulmurugan應用蟲熒光素酶對成肌調節因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網絡、哺乳動物細胞中蛋白質磷酸化提供了一個可靠、快速的方法。


GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態變化、細胞器動力學和內膜系統的運輸、信息轉導、病毒的運動和大分子的運輸等,Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,用激光掃描共聚焦顯微鏡,觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。


3.3監測環境
發光細菌發光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關系,能穩定、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環境樣本中MC結果和HPLC法檢測結果相關性較好,作為一種快速檢測方法,尤其對大批量、低濃度MC水樣的監測有較好的應用前景。于海將發光細菌固定于光纖表面,與光檢測系統結合,開發了一種發光細菌光纖傳感器,用于水中污染物毒性快速監測和評價具有較好的準確性和靈敏度。



3.4檢驗食品

3.4.1色素  
黨亞愛證明17種常用色素對發光細菌均有一定的急性毒性,細菌發光強度與色素毒性呈負相關,發光細菌可簡便、快速檢測色素口。

3.4.2 致癌物 
江敏研究了吲哚、吡啶、喹啉等6種含氮雜環化合物對發光細菌的急性毒性作用。結果表明,發光細菌的相對發光度均隨化合物濃度增加而線性降低,具良好相關性。

3.4.2微生物
高岳利用ATP生物發光技術對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結果與標準細菌培養方法有良好相關性,且不需復雜的設備,可用于食品快速篩選和現場檢測,是一項值得推廣的新技術。

3.4.3檢測農藥殘留
袁東星發現發光細菌發光強度與有機磷農藥濃度呈負相關,可用于現場快速檢測,稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。


4小結與展望

生物發光技術已在生物醫學、農產品、環保等領域中發揮重要作用。相信,隨著研究的進一步深入,它將在理論研究和實際應用中產生更大的價值。摘要:

目的:了解生物發光種類、機理及其在醫學、生物科學、食品、環保等領域的應用。
方法:對有關的文獻中生物發光種類、機理及其在上述領域的具體應用進行綜述。
結果:生物發光有兩類,機理明確,應用廣泛。
結論:生物發光在很多領域的應用日趨廣泛,對其深入了解和研究至關重要。


生物發光是生物發光器在細胞或生物體內發生光能釋放反應的過程。本文簡要介紹生物發光種類、機理及其在醫學、生命科學、食品和環保等領域的應用。


1 種類

生物發光主要有2種:①發生化學或生物學反應后產生的光能信號,主要有含熒光素酶的細菌、真菌、昆蟲等;②被激發后產生的光能信號,主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚、水螅等。


2 機理

2.1熒光素酶
熒光素酶是生物體內催化熒光素或脂肪醛氧化發光的一類酶的總稱。依來源,可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,FL)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,BL)。FL在Mg、ATP、O2的參與下,催化D-熒光素氧化脫羧,產生激活態氧化熒光素,并放出光子,產生550~580nm的熒光。BL以脂肪醛為底物,在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,產生490nm的熒光。


2.2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質內部第65-67位絲氨酸、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環化和氧化形成的,用紫外或藍光激發即能發出肉眼可見的綠色熒光,無需任何底物或輔助因子。


3 應用

生物發光作為一種非放射性、非創傷損害性、高靈敏度、實時動態的檢測技術,在醫學生物學研究、食品及環境檢測等領域應用廣泛。


3.1在生物醫學研究中的應用
生物發光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續動態觀察,在生物醫學領域被廣泛用于致病機理、藥物機制、新藥篩選評價等研究。


熒光素酶被廣泛應用于研究病毒感染、復制、治療。Luker用熒光素酶基因標記牛痘病毒,免疫1h后即可測得細胞內熒光,熒光的變化量直接反映病毒的復制量。王建東利用熒光素酶基因標記肺癌細胞,并將其接種于嚴重聯合免疫缺陷小鼠皮下,成功建立了穩定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,為肺癌進展、轉移以及藥物敏感性等相關研究奠定了基礎。


朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標記毒性大腸桿菌(ETEC),獲得了GFP基因表達、遺傳穩定的發光標記菌株,為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎。通過ETEc標記的GFP熒光可準確、簡單、快速反應細菌易位率的變化,為益生素篩選、評價提供依據。


3.2在生物科學研究中的應用

3.2.1在分子生物學中的應用熒光素酶基因廣泛應用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉錄調控研究,尤其對低水平表達的調控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,探討HBV轉導后調節序列(HPRE)的功能元件(α,β1,β2)對INF-α作用的影響,HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,而α,β1在INF-α應答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節奏,Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節律性。


Ikawa制作了在肌肉、脾、腎、心臟等器官中表達GFP的轉基因小鼠,表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標記,對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉基因小鼠,大大提高轉基因動物的制作率,減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。


3.2.2在細胞生物學中的應用
R Paulmurugan應用蟲熒光素酶對成肌調節因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網絡、哺乳動物細胞中蛋白質磷酸化提供了一個可靠、快速的方法。


GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態變化、細胞器動力學和內膜系統的運輸、信息轉導、病毒的運動和大分子的運輸等,Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,用激光掃描共聚焦顯微鏡,觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。


3.3監測環境
發光細菌發光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關系,能穩定、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環境樣本中MC結果和HPLC法檢測結果相關性較好,作為一種快速檢測方法,尤其對大批量、低濃度MC水樣的監測有較好的應用前景。于海將發光細菌固定于光纖表面,與光檢測系統結合,開發了一種發光細菌光纖傳感器,用于水中污染物毒性快速監測和評價具有較好的準確性和靈敏度。



3.4檢驗食品

3.4.1色素  
黨亞愛證明17種常用色素對發光細菌均有一定的急性毒性,細菌發光強度與色素毒性呈負相關,發光細菌可簡便、快速檢測色素口。

3.4.2 致癌物 
江敏研究了吲哚、吡啶、喹啉等6種含氮雜環化合物對發光細菌的急性毒性作用。結果表明,發光細菌的相對發光度均隨化合物濃度增加而線性降低,具良好相關性。

3.4.2微生物
高岳利用ATP生物發光技術對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結果與標準細菌培養方法有良好相關性,且不需復雜的設備,可用于食品快速篩選和現場檢測,是一項值得推廣的新技術。

3.4.3檢測農藥殘留
袁東星發現發光細菌發光強度與有機磷農藥濃度呈負相關,可用于現場快速檢測,稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。


4小結與展望

生物發光技術已在生物醫學、農產品、環保等領域中發揮重要作用。相信,隨著研究的進一步深入,它將在理論研究和實際應用中產生更大的價值。摘要:

目的:了解生物發光種類、機理及其在醫學、生物科學、食品、環保等領域的應用。
方法:對有關的文獻中生物發光種類、機理及其在上述領域的具體應用進行綜述。
結果:生物發光有兩類,機理明確,應用廣泛。
結論:生物發光在很多領域的應用日趨廣泛,對其深入了解和研究至關重要。


生物發光是生物發光器在細胞或生物體內發生光能釋放反應的過程。本文簡要介紹生物發光種類、機理及其在醫學、生命科學、食品和環保等領域的應用。


1 種類

生物發光主要有2種:①發生化學或生物學反應后產生的光能信號,主要有含熒光素酶的細菌、真菌、昆蟲等;②被激發后產生的光能信號,主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚、水螅等。


2 機理

2.1熒光素酶
熒光素酶是生物體內催化熒光素或脂肪醛氧化發光的一類酶的總稱。依來源,可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,FL)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,BL)。FL在Mg、ATP、O2的參與下,催化D-熒光素氧化脫羧,產生激活態氧化熒光素,并放出光子,產生550~580nm的熒光。BL以脂肪醛為底物,在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,產生490nm的熒光。


2.2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質內部第65-67位絲氨酸、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環化和氧化形成的,用紫外或藍光激發即能發出肉眼可見的綠色熒光,無需任何底物或輔助因子。


3 應用

生物發光作為一種非放射性、非創傷損害性、高靈敏度、實時動態的檢測技術,在醫學生物學研究、食品及環境檢測等領域應用廣泛。


3.1在生物醫學研究中的應用
生物發光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續動態觀察,在生物醫學領域被廣泛用于致病機理、藥物機制、新藥篩選評價等研究。


熒光素酶被廣泛應用于研究病毒感染、復制、治療。Luker用熒光素酶基因標記牛痘病毒,免疫1h后即可測得細胞內熒光,熒光的變化量直接反映病毒的復制量。王建東利用熒光素酶基因標記肺癌細胞,并將其接種于嚴重聯合免疫缺陷小鼠皮下,成功建立了穩定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,為肺癌進展、轉移以及藥物敏感性等相關研究奠定了基礎。


朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標記毒性大腸桿菌(ETEC),獲得了GFP基因表達、遺傳穩定的發光標記菌株,為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎。通過ETEc標記的GFP熒光可準確、簡單、快速反應細菌易位率的變化,為益生素篩選、評價提供依據。


3.2在生物科學研究中的應用

3.2.1在分子生物學中的應用熒光素酶基因廣泛應用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉錄調控研究,尤其對低水平表達的調控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,探討HBV轉導后調節序列(HPRE)的功能元件(α,β1,β2)對INF-α作用的影響,HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,而α,β1在INF-α應答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節奏,Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節律性。


Ikawa制作了在肌肉、脾、腎、心臟等器官中表達GFP的轉基因小鼠,表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標記,對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉基因小鼠,大大提高轉基因動物的制作率,減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。


3.2.2在細胞生物學中的應用
R Paulmurugan應用蟲熒光素酶對成肌調節因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網絡、哺乳動物細胞中蛋白質磷酸化提供了一個可靠、快速的方法。


GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態變化、細胞器動力學和內膜系統的運輸、信息轉導、病毒的運動和大分子的運輸等,Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,用激光掃描共聚焦顯微鏡,觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。


3.3監測環境
發光細菌發光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關系,能穩定、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環境樣本中MC結果和HPLC法檢測結果相關性較好,作為一種快速檢測方法,尤其對大批量、低濃度MC水樣的監測有較好的應用前景。于海將發光細菌固定于光纖表面,與光檢測系統結合,開發了一種發光細菌光纖傳感器,用于水中污染物毒性快速監測和評價具有較好的準確性和靈敏度。



3.4檢驗食品

3.4.1色素  
黨亞愛證明17種常用色素對發光細菌均有一定的急性毒性,細菌發光強度與色素毒性呈負相關,發光細菌可簡便、快速檢測色素口。

3.4.2 致癌物 
江敏研究了吲哚、吡啶、喹啉等6種含氮雜環化合物對發光細菌的急性毒性作用。結果表明,發光細菌的相對發光度均隨化合物濃度增加而線性降低,具良好相關性。

3.4.2微生物
高岳利用ATP生物發光技術對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結果與標準細菌培養方法有良好相關性,且不需復雜的設備,可用于食品快速篩選和現場檢測,是一項值得推廣的新技術。

3.4.3檢測農藥殘留
袁東星發現發光細菌發光強度與有機磷農藥濃度呈負相關,可用于現場快速檢測,稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。


4小結與展望

生物發光技術已在生物醫學、農產品、環保等領域中發揮重要作用。相信,隨著研究的進一步深入,它將在理論研究和實際應用中產生更大的價值。

上一個:液相色譜儀使用及工作原理

返回列表

下一個:電泳儀代碼故障處理方法

亚洲色图近亲乱伦| 高清无码一级高潮| 插逼日本无码| 麻豆AV色哟哟| 日本一级婬片A片免费放桃| 免费视频久久性爱| 黑人 av 伪娘ts 一区| 黄色电影在线观看av| 男女羞羞欧美网站免费观看| 九九精品字幕麻豆发布| WWW在线观看免费黄色视频网站| 免费呦呦三级片| 妺妺窝人体色www视频| 久操视频污在线观看| 操亚洲欧美| 8xAV内射| 国产欧美在线一区孕妇| 国产精品自拍探花视频| 18免费欧美| 天天操天天操芒果| 牛牛影视av在线播放| 欧美精品18videosex性欧美-十八禁无码免费网站-87AV | 9号精品人妻| 欧美 在线观看禁18| 好爽好想要午夜视频| 亚洲小说久久| 人人干人人操人人摸人人| 爱女亚洲精品三四五| 嘿嘿视频免费观看| 国产恋爱av| 97色狠| 免费操逼午夜视频 | 9av国产精品| 久久亚洲精品无码久久| 天天干2025色| 翔田千里全部视频| 日本操逼电影一区二区| 亚洲日本免费肏屄视频| 一区二区视屏| 一级亚州性爱片| 欧美操片视频网站| 日日操狠狠操夜夜操欧美| 人人插操我插我| 97性爱视频自拍在线| 黄片av影院| 免费黄片com| 日韩精品素人妻在线看| 色一性一乱一乱一91Av| 熟妇泄火 麻豆| 久久99日本视频| 91中文字幕在线人妻| 亚洲皇冠av在线| 国产精品一区二区精品视频| 天天日天天碰| 91无码色| 都是激情丝袜激情亚洲无码| 国产这里只有精彩视频99| 亚洲强奸乱伦性爱网 | 日韩成人免费性爱视频(中文字幕) | 中文 有码 亚洲 自拍 偷拍| 国产品无码久久久久久| 欧美日操女a| dao国网止| 三级a片在播| 国语疯狂操| 久久艹人人网| 极品无码av| 日本岛国片无码AⅤ片入口| aV中文日欧在线| 日韩欧美人妻精品爽爽| 333AV无码| 99二区超碰| 国产家庭乱伦系列| 一色屋2021| 久久九九99国产| 人人看人人摸人人要| 亚洲天堂日韩国产探花Av| 操逼逼九区| 熟女 乱 又仑 一区 二区 三区| 日韩在线视频观看的 一人妻| 亚州人妻在线播放| 亚洲精品一区二区三区新线路 | 日韩AV蜜乳| 熟女色v| 久久se精品一区精品二区 | 亚亚洲大胆啪啪| AV黄色海外| 懂色蜜乳av| 日韩国产情色天堂婷婷射射色射射| 操擦操| 尤物在线观看网址| 九九99wcom| SESE无码| 九99精品| 国产12AV| www.黄无码| 日韩强奸视频图片| 色乱AV| 久色伊人| 日本真人足交视频一区不卡| 亚洲狼色影视在线观看| 美女黄色视频毛片A级,男男女女互相操| .青娱乐中文视频| 狠狠干狠狠噪| 密乳AV.com| 一区二区三区四区男两女| 成人性爱免费视频播放器观看| 性感操逼高清无码视频| 亚欧国产三级视频| 情色片视频免费| av免费高清亚欧| 黄色性爱网站网址| 久久高清无码破| 五月丁香天堂网狠狠操| 91亚洲激情| 日韩免费一区三区四区视频| 日韩精品中文字幕亚洲三区| 美国大乳房无马久久久| 久久性爱视频免费播放| av一区在线网址| 无码AV无码精品| w w w操逼视频| 性爱视频免费抽插| 国产欧美操逼片| 色综合综网| 久操视频污在线观看| 精品人妻毛片网| 亚洲欧美性爱图片| 九月丁香啪啪激情| 国产熟女乱乱| 17国产熟女乱轮| 亚洲激情成人视频小说 | 午夜真人操逼视频| 日韩综合操逼| 操臂国产下载| 另类视频成人小说| 五马一区二区潘金莲| 日本三级片免费麻豆| 99热任你操| 毛片黄片免费观看| 亚欧性爱久久久| 骚逼无码二区| 免费观看91人妻视频| 欧美久久久久久久久性爱| 中文字幕av一区二区三区Julia| 谁有手机看的av| 91九色人人操| 26uuu国产成人在线| 欧美日韩亚洲乱伦强奸| A∨在线播放| 国产妖精黄色日逼| 尤物社区www.yw163| 性爱视频在线观看免费成年人| 日韩无码,COM| 啊v欧美资源在线播放| 天天吃天天干天天上天天色| AV高清无码久久| 黄色片在线免费看高清无码| 21乱伦超碰| 日韩强奸视频图片| 国产高无码精品| 免费看性爱小视频| 99视频这里只有精品在线| 大香蕉在线君视频| 国产干屄乱伦| 美女网站很黄| 国产无码操小逼视频特级黄片| 日本人妻操逼视频一区| 欧亚日韩无码啪啪| 生生av在线| 青娱乐国产9| 色老汉综合三区在线| 国模剧情一区| 玩广西的熟女91| 青青草在线午夜福利视频| 我操你操我综合| 91午夜精品久久| 牛牛精品免费视频| 三级片香蕉视频小说| dao国网止| 无码人妻一区二区三区啪啪视频| 亚洲AV八戒| 操婷婷综合| 欧美日韩操逼季| 探花熟女精品| 毛片黄片免费观看| 99视频这里只有精品在线| 人人人摸摸摸| 国产操逼综合亚州| 国产A∨成人无码精品| 91插插插 mp4| 欧美V日本操死| dao国网止| 久操网亚洲| 1769国产视频| 成人性爱视频AV www在线观看| 爱国精品无码国产AV| jizz中国偷拍| 国产懂色av网址| 超在线天天干 | 麻豆Aⅴ96性欧美| 岛国艾薇在线观看| 亚洲超碰AV无码| 播放激情黄色QVOD视频| 艹艹国产艹艹国产艹艹国产老师 | 国产男女18禁止| 熟女 乱 又仑 一区 二区 三区| 操骚免费簧片免费| 无码黄色视频网址| 奇米影视888狠狠狠| 久久精品新| 国产高清9999| 日本韩国性爱视频在线观看| 亚洲最新三级乱伦AV| 国产黄色片一二三区| 人妻色色中文凹凸色视频| 秋霞一区二区三区毛片| 亚欧国产中心视频| 老男人毛片| 无码日本成人| 欧洲性爱久久| 性爱综合导航| 黄色欧美性爱区| 日本欧美高清视频无码在线观看| avyy在线| 日韩综合激情久久| 超碰在人妻中文字幕不卡| 18禁无码永久免费无限制网站| 综合色插逼| 国产黑料午夜| 黄色性肏九区欧美| 人妻系列中文字幕在线视频| 亚洲 欧洲性生活av| 操我逼操| 一起草av第一页| 深夜激情五月| 岛国A√无码在线| 亚洲性爰视频免费看| 久久日熟在线视频| 一级大黄片欧美久久| 日韩第一页日韩第一页精品 | 国产主播玉足足x| 日韩精品人妻中字| 禁十八岁禁精品视频夜,站| 人人操人人摸人人舔人人| 套 ,av.com| 久久好好干干| 天天操分分艹| aPeCOn日本护士高潮| 人人爱人人操人人叫| 午夜精品肥婆| 天空色情乱伦综合网| 香蕉一级快播| 国产 欧美 欧洲无码| 夜夜草字幕| 操B视频大全一区二区| 91国產乱| 日本韩国黄色网址| 欧美精品久久久久久久久无码| 夜夜操五月青青草激情| 在线中文高清精品人妻| 亚欧高清无码在线免费观看av| 日韩v炮| 黄色片在线免费| 伊人色情激情网| 色色无码在线影院| 日本韩国性爱视频在线观看| 超碰色人妻| 干干干,日日日| 91色五十路熟女| 最新国产黄色2024| 亚洲欧美午夜福利| 黄片免费观看国产精品视频| 日本熟女热| 呦呦精品另类视频| 69无A片| 91热,熟女.人妻| 黄片AV免费在线观看 | 曰本一个色导航| av黄色资源在线观看网站| 亚洲高清无码网页| 亚洲国产成人精品女人久久久,国产精品美女 | 伊人a.v在线| 九九无码精品国际| 综合色插逼| 手机在线免费观看一级黄色视频| 乱伦强奸 无码一区| 97人人看人人摸人人操| 亚洲日韩啪啪性爱小视频| 久久久成人高清拍囯产| 精品中文字幕蜜乳AV| 淫荡少妇求插视频| 日韩第一页日韩第一页精品| 人人爽人人操人人操人人操人人操| 操逼视频红色| 国产一区二区视频在线77777| chinese嫖客video探花| 91人人摸人人操| 久久久亚洲av无码精品| 人人摸人人操小说网| 岛国一区二区无码在线| 欧美黄色性爱电影视频综合社区| 99热只有精品在线观看| 亚洲成人性爱小电影免费| 草B小视频| 男女无套免费97| 内射婷婷| 五十路婷婷一| 国产无码三a久久久| 26uuu在线更新| 大黑逼无码| 男女操逼日韩| 操逼福利视频痛| 福利在线 操 逼| 免费看性爱的网址| 日韩色欲久久久| 啊啊啊黄色好大网站在线观看| 男女AA精品| 国产精品 成人久久| 三女被二男A片试看| 久久久久 国产 高清| 色色深夜| 久碰资源| 日韩无码COm| 婷婷五月手机版| 超碰美女丝袜在线| 人人操WWW| 国产无码夜色超碰| 日本操逼视频最新| 黑人探花系列| 亚洲国产久久久久久| 26uuu在线更新| 波多野结衣影音先锋人妻中文字幕| 欧美成人亚洲无码在线观看| 黑人操亚洲XX| 翔田千里a片在线观看| 久这里只有精品视频| 久久资源婷婷五月| 日B干爽| 美国天堂Aⅴ| 天天干,天天日五丁香日| 亚洲综合高清成人在线| 嗯啊额啊网站| 动漫激情网站视频| 人人操人人操人人操人人操人人操人人操操女人 | 欧美日韩性爱潮吹两性网| 岛国大片国产精品| 天热久啪| 26pao国产永久免费| 黄片AAAA10000| 无码狠狠躁久久久久久久91| 日本三级片免费60分钟| www.黄无码| 欧美aaaaaaaaaaa一级黄片| 91啪啪啪片| 日本us影院| 在线爱V 欧美| 性一级黄片内射偷拍| 欧美孕交亚洲探花| 激情se在线| 微拍韩金丽福利恒淼淼视频久久| 午夜在线视频A片| 男人天堂A∨2024| 久久99国产 亚洲视频| 成品人片a91直接观看入口动漫| 欧美videos在线超碰人人操| 国产超碰人人做人人爽 | 91 久久网| 日本最黄视频护士| 久久 色视频| 欧美碰99蜜桃| 日本不卡高清操逼视频免费看| 精品啪啪在线| 亚洲熟女色网站| 亚洲无码高清淫网| 干妞7777| 人人操,人人摸,人人搞| 91电影操逼| 欧美大香蕉二区| 无码人妻精品一区二区三区介绍 | 嘿嘿嘿网址在线| 欧美黄色-级性爱| 另类av一区在线| 日韩国无码一起草| 久操一区二区| 亚洲2024AV天堂手机版| 操13视频无吗| 国产麻豆日日操| 很黄很黄很黄免费网站| 国产无码操逼A片| 九九操精品视频| 亚洲AV无码成人精品区八戒| 亚洲青青欧美| 日韩精品视频亚洲日韩| 色老头免费视频一三区| 岛国片在线观看极品尤物| 青娱乐网国产站在线观看 | 操逼啊啊好爽国产一区| 乱伦视频先锋播放| 香蕉AV爽爽爽爽| 少妇精品无码一区二区免费 - 百度 - 百度 | 91shipin01.com| 秋霞91爱爱| 好硬好深好爽18禁视频网站| 人人操人人人操人人人人操| av嫩草| AV乱伦中文字幕| 日a导航第5页| 操逼AOOA| 亚洲性爱自拍| 日本肛在线视频首页| 日韩精品二区视频| 日韩操逼视频图片| 免费线上啪啪啪成人视频十八禁 | 午夜影院之黄片| 夜夜草,天天干视频网站| 3333无码一区二区| 亚洲频道成人视频| 亚洲强奸乱伦精品| 久久久精品无吗| 艹艹综合| 成人性爱免费视频播放器观看| 快操国产| www.yw1139.com尢物视频| 热女久久久久久久久久久久 | 国产牛仔裤美女一区二区三区| 最新殴美成人一级性爱视频| 海外A片自拍小视频大全| 免费马上能看操逼视屏| 操片免费无码| 日韩欧美成人性爱小说在线免费观看| 韩日自拍偷拍我| 天天日搞搞| 黄色在线片| a片免费大肥逼插| 日韩欧美操逼逼| 日韩精品二区视频 | 黄网站免费观看的| 啪软件视频丝袜美腿| 人妻中文日韩| 日韩成人啪啪免费视频| 中山理莉人妻中文字幕| 牛牛精品免费视频| 人妻-X88AⅤ| www久操com| 超碰抽人妻| 婷婷三级片久久| 乱伦中文字幕99| caoprom超免费视频手机版在线观看| 色www亚洲国产阿娇| 大象视频成人影院| 人人操人人摸人人操97| 人人摸人人舔人人插人人操| 免费黄色网址在线免费观看| 香蕉网久久日韩1级黄色大片| A V观看在线| 亚洲日韩在线强奸| 26uuu久天堂在线| 久久娱乐一区| 免费的在线观看的黄色的网站| 国产乱论图片| 天天干天天日夜夜草| 18禁大刺激网| www.yw1139.com尢物视频| 色虐三级网站| 色鸡色综合网| 天天躁日日躁AAAAXxxx| 日本黄色三级A片| 无码乱伦强奸小视频| 91天堂久啪婷婷老司机| 黄片免费桃花日韩| 福利麻豆乱伦| 孰女乱伦第一区| 暖暖日韩在线观看| 黄色性爱欧美视频了| 久久久久艹免费视频| 99色拍| 极品美女视频三级影院| 中文字幕在线观看95456P| 日本a三级毛大片不卡| 天天天干干干干干| 中文音声淫语一区二区在线 | 亚洲欧美日韩成人小说| 日韩乱伦小说999999| AAV调教视频网站在线观看| 日韩亚洲一区二区三区精品在线| 国产一区在线视频操我| www国产操逼视频com| 久久久亚州无码精品| 欧美性爱日韩精选| 日本欧美操逼片| 操屄综合| 翔田千里无码观看视频| 久久久久成人AV无码| 亚洲手机成人高清视频| 青娱乐欧美久久双飞| 天天做天天爱天天日天天干| 青娱乐精品九九| 亚洲高清无码成人视频| 99久久久无码韩国精品性| www.18禁小视频| 成人久久18秘 欧美| 久久午夜无码鲁丝片主演是谁| 欧美大香蕉久久久| 岛国V拍免费在线观看| 牛牛影视av牛牛影视av无码| 欧美v国产V日韩v| 竹菊影视国产一级一片| 538Porn在线视频观看国产| 超碰色人妻| 啊啊A片在线播放| 国产传媒 日韩欧美 | 乱按视频污| 日本三级片免费60分钟| 操13视频无吗| 一二一二国产| 全国免费观看a| 免费的啪啪视频性爱| 亚洲VAV| 国产无码操逼A片| 囯产久久久久| 熟女色播网站| 一级a性爱免费看永久视频| 中文字幕-第25页-91JQ就要激情网91JQ8.92JQ92.WORK | 自拍偷拍日韩欧美人妻| 黄页网色an无码| 爽爽爽爽高潮午夜视频| 日韩欧美另类video抽插| 亚洲五月丁香美女| 国产片去操逼| 亚洲色图近亲乱伦| 综合影视| 亚欧色乱视频| 日韩欧美自拍视频| 人人插人人摸,人人操| 欧美日熟女牲交| 无码视频毛片视频| 欧美日本A V| 小黄片免费在线观看无码| 人人艹人摸| 日韩操逼欧美BB| 性爱免费试看视频| 人人摸人人操小说网| 俺久久综合去| 日韩无码国产片岛国片| 99精品国产热久久婷婷天堂_国产亚洲色婷婷久久99精品91_婷婷综合尤物精品国产 | 欧美亚洲黄色性爱网站| 亚洲爱啪啪视频^_^| 在线无码观看AV观看| 岛国a v免费| 亚洲色图 强奸乱伦 中文字幕 高清无码 | 色接久久综合网| 久久九九视频这里只有精品| 七夕大香蕉涩涩资源一区二区| 色逼逼色婷婷| 欧美一级特色AAAAA| 丁香 婷婷 五月 激情 999| 看黄色的中国片| 国产一区二区三区精品视频在线观看| 国产av高清经典| 可以在线观看的黄色AV网站| 日韩影音在线| 国产久久Aⅴ| 亚洲精品91探花在线| 成人yijixingaishipin| 秋霞网欧美久久久| 人人添人人插| 2001狠狠操| 91--乳蜜视频高清免费观看| 人妻 中文91| 射你吧在线影院| 黄色毛片AV网站| 国产强奸AV一级| 日韩AV乱伦中文| 岛国片在线观看极品尤物| 黄片在线免费看a| 久久人妻精品中文字幕一区二区| 黑人操亚洲XX| 亚洲AV无码成人精品区八戒| 黄色片手机在线播| 99色拍| 日韩AV极品| 欧姜性爱黄色| 欧美日韩重口味操逼| 国产乱伦区| 一级片大香蕉久久| 成人趴趴视频| 无在线观看高清无码视频| 黄色一级a美女毛片| 人操人人操人人人人| www操操操操操操逼视频com| 国产亚洲无码视频在线| 免费在线看的黄片.| 黄色AV网站大全| 黄色尤物视频在线观看| 九久九欧美性爱| 草莓欧美视频在线| 尤物在线观看网址| 性生活视频十八禁止| 26uuu影视一起cao| 三级片对对对碰| 成人aV无码精品国产一区二区 | 超碰福利第一导航| 亚洲性爰卡一卡二| 91人人摸人人操| 国产免费观看操逼精品视频| 2024最新涩涩网站| 国产片去操逼| 情侣做爱十八禁| 国产高无码精品 | 日韩精品在线成人小说| 日韩大香蕉插插插| 久久久亚州无码精品| 94操国产三级| 成人黑料视频一区二区| 五月丁香啪啪啪激情综合网| 2001狠狠操| www黄片在线看| 一区二区xxx八戒| 日本操鸡aa| 日韩在线观看亚洲精品| 色色无码中文| 久久 色视频| 久久久精品无吗| 99久久久无码国产精品日日播| 好看的黄色一级性爱片| 精品国产一区二区三区免费胖女| 在线亚AV观看| av人人| 色吧 性| 中国无码操逼逼强奸逼| 亞洲亂倫色情AV片| 欧美时装视频网站 专区免费观看 日本真人足交视频一区不卡 | 很黄很黄的粉嫩p| 欧美日韩国产岛国| 国产欧美日韩厕| 色www网站免费观看下载| 模特美女操逼色视频伊人一区| 全国免费观看a| 3D久久久久无码AV| 搡国产老熟女老女人| 中国老熟女三区| 亚洲色图中文字幕国产乱轮| 人人摸,人人操,九九久久| 自拍偷拍大陆高清| 久热在线成人视频| 毛片6699| 操操操自拍| 淫荡无码| 最新乱伦熟女网| 亚洲无码高清淫网| 欧美一区二区A片网| 天啪啪视频2017| 性生活视频十八岁免费观看| www樱桃漫画黄网站喷水直接进| 国产视频3| 超碰91人人操吃瓜| 日本三级护士高湖| 干逼AVwww| 国产激情片五十二区| 男女床上免费视频网站| 国内成人性爱视频| jj日本操操操| 波多野42部无码| 欧美,日韩精品| 国产猛男碰碰熟女AV| 国产超碰图片| 性爱网站欧美| 色色无码中文| 欧美吊操性爱大片| 乱论熟女专区| 国产第三十页| 成人性爱视频AV www在线观看| 精品懂色AV| 人人操,人人摸,人人搞| 亚洲精品国产三区| 免费看欧美日韩一级性爱视频| 中文音声淫语一区二区在线 | 人人做人人摸人人操| 岛国情色视频在线观看| 想看黄片网站| renrencao97| 竹菊影视国产一级一片| 人妻之久久黄色视频| 天天做天天爱天天日天天干| 国产精品呦呦视频| 十八禁在线www| av在线aaaa| 国产AV久无码无遮挡| 中文叼嗨人妻A片| 91精品无码软件| 干骚无码| 淫乱Av影视首页| 在线亚AV观看| 中文字幕-第25页-91JQ就要激情网91JQ8.92JQ92.WORK | 免费黄色网址在线免费观看| 高清成人国产无码| 在线观看搞a v| www.mm527.cn99精品视频只99有精品,国产成人精品综合久久66,91精品福利尤物视 | 成人传媒高清在线视频| 日韩精品一线二线三线三上悠亚 | 无忧无码在线| 国模图片1区二区三区 | 亚洲日逼视个频| 日韩色23| 国内女人嗷嗷叫流水视频网站| 久久久久亚洲av成人无码网站| 黄片在线免费视频播放| 18禁成人在线播放视频| 性做大香蕉久久久久久久| 超碰色人妻| 久久高清超碰| 99r视频在线播放| 经典三级久久精品亚洲专区| 黄色性肏九区欧美| 亚洲最大中文字幕熟女| 中美毛片视频免费观看| chinese嫖客video探花| 国产一级AAAA18| 色欲人妻久久| www,45黄色电影| 黄色大片网站av| 亚洲无操逼| 色无码咪咪奶在线观看视频| 日韩精品素人妻在线看| 39久久久久久久| 精品只有这里有| 国产精品久久久久无码网站| 黄色片,www, com777| 日韩无码玖玖玖| AV黄色海外| 性爱无码/区二区| 欧美高清a片激情| 亚洲及日本男女操逼视频| www.亚洲欧美高清| 日色导航| 人人操人人操天天干| 好爽好想要午夜视频| 激情文学无码| 久色伊人| 操我日韩| 亚洲一区二区精品中文| 偷拍本地日韩视频| 亚欧韩在线观看| 洗浴中心偷拍系列一区二区| 美女私密视频影院| 午夜AA视频新品| 亚洲综合在线成人影院| αa国产在线小视频| 嫩草永久免费网站| 欧美日韩操逼季| av无码小片在线观看免费网站| 最新东京热国产精品| 四虎黄片床上动作片| 嘿嘿嘿网址在线| 思思国产热最新在线观看| 人人人人摸人人操人人′| 欧美婷婷伊人中文字幕| а∨在线网| 操比福利网址视频免费观看视频| 国产成人久久大象视频精品| 国产精品亚洲勾搭| 亚洲日韩26uuu| 国产黄片高清视频免费在线观看| 亚洲久艹伊人| 日本一本操小BB比| 操逼逼逼操逼逼逼逼操操逼逼视频| 深田咏美在线观看视频一区二区| 操逼逼逼操逼逼逼逼操操逼逼视频| 人人爱人人搞人人干| 香港成人三级无码a片| www亚欧无码红桃| 国产,日逼片| 婷婷色无码在线观看| 妺妺窝人体色www视频| 亚洲中日韩在线| 无码人妻最新消息网站视频| 一区二区免费看啪啪| 91午夜精品无码秘 18久久久| 18禁啪啪啪成人免费观看| 91快播亚洲综合小说网站| 18禁 视频 在线| 无码精品人妻一区二区三刘亦菲| 8x8ⅹ国产精品一区二区二区| 免费草B网站| 岛国AVAPP下载观看五码| 亚洲色图影音先锋强奸乱伦| 国产精品呦呦视频| 直接看黄色片| 乱码日逼片| 九九九久久久99| 亚洲 欧美 小说 国产 图片| 大香蕉在线日韩| 翔田千里一区二区蜜臀| 9911成人资源| 黑人巨大欧美精品一区二区—百度| 韩国经典a毛片在线免费观看| 操你啦,狠狠操,使劲操,夜夜操| 91丝袜脚足交在线视频| 日本一级婬片A片免费放桃| 久久久久久久久久久水多多| 丁香九月婷婷综合色| 操逼啊啊好爽国产一区| 国产熟女精品67194| 九九无码精点品| 黄色篇高清无码| 熟女,中文字幕,海角| 国产强奸乱伦a视频| www.av性爱| 高潮毛片无遮盖免费| 男女羞羞欧美网站免费观看| 久久思思呲呲| 无码人妻欧美日韩精品一区二区三区| 黄色爱V| 超碰人人操90| 成人亚洲小说无码| 国产精品高潮无码久久AV| 美国亚洲不卡| av黄色免费| 黄色大片大人看| 新91人妻视频| 黄色av免费观看| www ,黄片| 99热青草在线观看| 麻豆91黄片| 国产亚洲精品无码成人WWW在线| 日韩操遇黄片视频| 超碰成人美女| 国际av网| 操逼系列首页| 国产亚洲无码在线观看| 色av尤物| 强奸乱伦日韩系列| 日本爱爱网址夜| 性爱工作室A片〈毛片〉| 日B干爽| 男女无套免费97| 性爱视频在线观看免费成年人| 性爱无码/区二区| 可以看黄色的免费网站| 自偷自偷亚洲| 丁香 婷婷 五月 激情 999| 伊人精品热8| 直接看黄色片| 粉嫩AV.COMAV大本营| 在线观看 91 偷偷拍| 人人人插人人人| 国产卡通中文字幕H| 操大逼了日韩| 操逼小视频网址| 亚洲精品国产成人综合久久久久久| 亚洲高清美女| 国产乱伦丝袜熟女一二三| 激情网络在线观看视频| 日韩国无码一起草| 操逼应用视频国产| 操逼应用视频国产| 久天堂无码| 日韩第一页日韩第一页精品| 国摸人体大胆一区二区| 日韩成人免费性爱视频(中文字幕)| 久久国产狼人影院| 91shipin01.com| 6080亚洲人久久精品69| 亚洲 欧美 日韩 成人综合在线| 国产精品影院直播| 毛毛在线视频精品播放| 欧亚在线无码影视| 爱啪啪精品三区| 亚洲综合啪| 五月天丁香综合久久国产| 欧美黄色黑人.一区| 操婷婷综合| 欧美偷拍免费| 69成品人视频免费观看| 极品尤物粉嫩馒头p,手机在线观看你懂的高清完整视频_自拍欧美在线视频一区_国 | 在线观看AVwww.| 日韩两性黄片视频| 五月丁香一区二区三区| 成人性爱视频日本| 黑人巨大欧美精品一区二区—百度| 91操B视频在线| 91精色视频| 日韩性爱A完整版免费看| 十八禁性爱影院免费观看| www操 com| 日韩系列 无码| 人人操小说| 午夜美女下面| 牛仔裤一区二区三区在线| 91超碰网址| 九九九九九精品,久久久久久影院| 肏欧洲熟女| 91人妻日日做| 一起草av第一页| 大香蕉淫荡网| pppe一88人妻| 麻豆婚内出轨国产aⅴ| 日老太太一区二区| 色欲v人妻一区二区三区| 国产懂色av网址| 欧美亚洲日韩九九| 亚洲欧美探花| 再多弄点黄片一男一云里停的那个网| 日韩亚成人性爱大全| 人人操人人操人人播| www.永久se.com| 国模精品自拍| 女无套 免费视频网站| 欧美影院| 蜜乳精品一区| 激情综合九月丁香色婷婷| 啊啊啊黄色好大网站在线观看| 国产妇女乱伦乱码一区二区三区| 91成人小视频在线观看| 热久久大黑| 一婬妇片A片AAA毛片秋霞 www.litai-wj.com| 久久久久久久良精品视频| αV电影在线播放| 亚洲操逼综合网站| 114福利导航| 波多野结衣无码一本| 国产操逼傳媒| 秋霞网操逼电影| fsdss-854蜜乳av| 日本驲屄视频看| 七十二插大香蕉| 影音先锋在线观看资源日| 日本无码a片免费网站| 牛仔裤一区二区三区在线| 玩广西的熟女91| 亚洲综合高清成人在线| 人妻色色中文凹凸色视频| 99精品国产热久久婷婷天堂_国产亚洲色婷婷久久99精品91_婷婷综合尤物精品国产 | 人人摸人人c| 男女交配网站18| 人人操人人尻人人操| 日本三级毛片免费观看| 天天日搞搞| 91精品国产综合久久婷婷图片| 亚洲六区熟女中文字幕自拍| 2024年中国女门口黄片| 日逼的视频丁香| 国产美女www| 香蕉黄网AAAA| 777人人妻| 18禁爆乳W久| 深夜理论无码| 韩日高清无码视频| 天天干天天日天天插11swwkt| 色色综合无码| 影音先锋| 企业AV在线| 乱轮五月天小说中文字幕| 久逼一 | 国产A片日本| 有逼无码| 欧美精品18videosex性欧美-十八禁无码免费网站-87AV | 欧美性爱区一区二| 成人免費視頻| 亚洲Av无码国产精品久久| 韩国AAA级| 久操天堂网免费观看| 岛国网站入口| 人人操人人操人人尻| 国产精品 成人久久| 欧美精品一二三线| 99久久久无码国产精品主播| 日韩伊人综合网| 国产操逼综合| 亚洲性爱乱伦图片| 世界操逼AV| 亚洲精在线视频| aSS视频一二三四五六区| 欧美成年人性爱在线看| 99首页精品| 密乳AV.com| 免费看性爱小视频| 人人操欧美日本| 一级黄色视频在线| 欧美人与性动α欧美精品z| 免费看黄色大片骚| 全国免费观看a| 人人摸人人c| 欧美一区传媒| 欧美呦呦在线观看| 婷婷成人网五月天| 亚洲人妻精神国产一区| 欧美18禁在线自慰| 国产欧美在线一区孕妇| 香蕉一级快播| 九九黄啊黄色片| 日本欧美高清视频无码在线观看| 先锋影院日韩一区| 来一个国产的真人的操逼视频| 黄片在线免费观看网战| 竹菊影视国产一级一片| www.日韩精品线路| 久草色AV| 亚洲两性网站| 人人操色欧美| 国产黄片无遮挡刺激| 精品人妻一区二| 99r在线视频播放| 五月天丁香婷婷基地| 美女高潮嗷嗷嗷视频网站| 日本us影院| 欧姜性爱黄色| 强奸乱伦国产一区二区| 轮奸乱伦精品四区| 成人aV无码精品国产一区二区| 免费黄片com| 视频二区欧美日韩| 偷拍自拍在线视频| 国模白灵人体一区二区| 8xAV内射| 亚洲日韩中文字幕一二三区| 欧美一级大香蕉| 亚洲小说日韩欧美呦呦| 操擦操| 中文精品字幕一、二、三区| 欧美成人免费在线观看性爱视频| 激情伊人影院| 老司机老鸭窝护士极品| 色欲精品人妻AV一区| 日韩无码性爱一区| 综合www色| 亚洲国产精品无码成人区| 婷婷五月男人先锋资源站 | 91网站原视频| A区性爱视频| 三八神马午夜aa片| 性爱视频在线免费看日韩| 熟女色v| 亚洲中文一区字幕在线| 黄片视屏免费观看视频| 青草熟女久久久| 99食品青草| 狠狠肏屄免费视频| 无码色色视频免费| 婷婷丁香五月天另类天堂| 性情无码视频| !91尤物视频| w98永久免费 - 人妻熟女| 美欧VA乱伦网| 亚欧色欲无码免费视频| 日韩情无码| 日韩国产探花天天更新在线观看| 在线网站18禁视频| 人人一级| 91网站原视频| 亚洲成人咪咪色| 肥熟国产| 看日肥屄| 很黄很黄的粉嫩p| 91绿帽人妻尽情享受单男| 中山理莉人妻中文字幕| 久这里只有精品视频| 狠狠抽导航| 大家正在搜,69AⅤ| 这里只有精品2020碰碰| 五月丁香一区二区三区| 777奇米色狠狠| 亚洲一区人妻中文字幕| 最新日韩无码-推荐日韩无码 - 右手影院| 手机免费黄色在线观看| 啪啪爽午夜| 欧美αα| 蘑菇熟女精品视频| 粉嫩AV区二区线看视| 收费的成人AV网站| 日本肛在线视频首页| 国产无码Av骚| 91眼镜人妻| 色欲精品人妻一区二区三区综合视频| 美女网站很黄| 精品一区啪啪视频| 日韩无码中文字幕强奸乱伦| 日本成人片玩。网址 网址。| 日本六十路在线观看| 91足交视频免费看| 性电影66666777αa| 蜜臀色欲| 寂寞影院h国产一区| 久久综合一视频| 日韩 人妻 精品 一区| 激情网络在线观看视频| 成人超碰图片| 亚欧真人射精| 五月天婷婷成人激情小说网| 久天堂无码| 亚洲欧美日韩综合午夜成人影院| 91九色人人操| 欧美日韩性爱在线观看视频| 性生活视频免费18岁以上| 国产探花精品一区在线观看中文字幕| 日韩AAAAAAAA片| 天天操欧洲年青美女r| 免费啪啪一区二区三区| 麻豆AV色哟哟| 91五月天激情综合久久| 尤物aV大本营| 熟女偷拍第一页| 密乳AV无码影视| 自拍偷拍大陆高清| 全科高清无码操逼| 91 久久网| 黄色工厂免费观看| 亚洲擦逼网| 高清十八禁十八厘米| 欧美强奸A视频| 国产乱码乱伦| 91妻绿帽精品| 性色Av。| 亚欧成人在线观看视频Ⅹ××| 乱伦日韩欧美中文| 婷婷成人网五月天| 插x91入插插| 久久久超碰9| 日韩欧美操逼逼| 欧美十八www| AV迷奸亚洲美女| 最新手机黄色在线| 在线黄色网址手机观看| 大桥未久色情A片在线播放| Av乱伦无码| 肥熟国产| 香蕉人妻超碰在线| 在线无码千里| www.人人操人人操人人操人人操| 国产无码av性情| 乱伦吃逼三区| 全国免费观看a| 秋霞在线大地资源有码无码一区二区三区 | 69人人摸人人操| 保姆边做饭边操逼视频| 人人肏精品视频| 色香蕉婷婷丁香亚洲综合网| 日韩乱伦小说999999| 2级性爱视频中| 欧美 在线观看禁18| 欧美强奸A视频| 日逼小视频正品福利| 操壁无码国产| 欧美色综网| 国产成人无码免费精品久久 | 内射大雷无毛骚逼| 超碰导航福利| 探花一区二区av| 人人操人人左| 欧美在想性爱| 在线黄色网址手机观看| 极品美女裸体视屏久久久| 免费看国产乱伦黄片| 国产无码久久成人| 日韩AV性爱片| 日韩xx83| 少妇A级黄片| 1999年高清自拍偷拍视频| 亚洲AV无码成人精品区八戒|